PEG聚沉+超速离心 试用报告 ：Sci Rep文章技术重复

yulia

版主，是先把血清超离去掉exosome，再配置含10%FBS的培基？还是配置好含10%FBS培基后，把培基超离？你用的哪种方式？

hzangs

yulia 发表于 2016-5-14 15:20
版主，是先把血清超离去掉exosome，再配置含10%FBS的培基？还是配置好含10%FBS培基后，把培基超离？你用的 ...

前者~

陆峰彬

hzangs 发表于 2016-4-27 16:54
你用  DC细胞  或者MSC  或者 胰腺癌细胞 就知道了   那产量，简直是细胞把自己粉碎了 然后往外吐 ex ...

版主你好，请问MSC外泌体分泌多？具体有多少？有提过的说100ml也就10ug，现在实验提取，不知道自己提的怎么样，想请教一下，谢谢

hzangs

陆峰彬 发表于 2016-5-18 14:05
版主你好，请问MSC外泌体分泌多？具体有多少？有提过的说100ml也就10ug，现在实验提取，不知道自己提的怎 ...

MSC 外泌体我没有做过具体的分离尝试。 但是因为周围有人做MSC的外泌体。 只是问过，说产量很可观。

jeff

不洗可以吗？life的kit里面好像也没有洗。。。

hzangs

jeff 发表于 2016-5-19 11:56
不洗可以吗？life的kit里面好像也没有洗。。。

最好还是洗洗    不然 杂蛋白太多了

whjy2004

请问楼主 ：制备exosome-free FBS 的离心条件？转速和时间

hzangs

whjy2004 发表于 2016-5-19 16:10
请问楼主 ：制备exosome-free FBS 的离心条件？转速和时间

110000g  14-16h~

冷雪儿翱翔

hzangs 发表于 2016-4-27 16:01
这是一个外泌体释放量十分大的细胞。  收集这些外泌体 大概用了7ml 培液

细胞那么给力？赞！

子非鱼

hzangs 发表于 2016-4-26 23:12
第一次 3000g 我还真没有尝试过。
只要有沉淀，基本里面就有外泌体的~

斑竹，我用ExtraPEG，提取培液没有看到沉淀。之前用SBI的kit提取8ml就能见沉淀了，上质谱的结果与ExoCarta能match到89%，所以一开始用ExtraPEG时候，用7ml的培养基，没有见到沉淀；然后又增加到24ml的量，提取，加同等体积的PEG6000，还是没有见到沉淀....我用的4000g离心的（我知道楼主此处用10000g，但是我同时提取血清的外泌体，4000g没问题的），所以想请楼主帮忙分析下可能的问题....多谢！