想统计下大家用超速离心时一次用多少量的细胞上清才够用

桃花灼灼 · 发表于 2019-1-14 09:16:04

本人刚开始做外泌体，请教一下楼里的大神们，我的细胞已经在6孔板里长了五天，第三天的时候密度已经90%了，还能处理后收集细胞上清液吗？会不会细胞老化了，分泌外泌体就少了啊

出尘7 · 发表于 2018-12-28 16:20:17

没用两个T75板的上清，

alex · 发表于 2018-11-15 15:28:15

100ml够吗?

cecily001 · 发表于 2018-11-14 13:41:49

我做电镜的细胞上清一般至少都提50mL的

hzangs · 发表于 2018-11-7 12:03:23

teddy溶溶发表于 2018-10-25 15:15
看了好多人反应包括测序公司都说细胞上清提取出的exo量少的可怜，我这次决定用20以上个培养皿收集。请问大 ...

木有。一般杂WB是最快的方法……当然如果你可以随时打电镜的话电镜最快

teddy溶溶 · 发表于 2018-10-25 15:15:44

看了好多人反应包括测序公司都说细胞上清提取出的exo量少的可怜，我这次决定用20以上个培养皿收集。请问大家除了电镜和蛋白鉴定法，还有什么方法能快速省钱检验自己提出来的是外泌体呢？

huangth16 · 发表于 2018-9-18 16:21:07

木瓜31 发表于 2015-5-7 21:37
那一般多少量细胞上清超离够做电镜鉴定呢？

这个不光看多少上清，关键还要看你最后用多少体积pbs重悬，要看最终外泌体的浓度而不是总量，而且不同细胞会不一样，

peggy4598690 · 发表于 2018-9-14 12:40:34

nixiao 发表于 2018-9-12 20:42
请问有没有人除了测提的外泌体还测过离心后上清里面的蛋白的？

你可以参看看这篇，他似乎就有做上清中蛋白的分析~~
Effects of storage temperature on airway exosome integrity for diagnostic and functional analyses.

nixiao · 发表于 2018-9-12 20:42:00

请问有没有人除了测提的外泌体还测过离心后上清里面的蛋白的？

阿赵 · 发表于 2018-9-8 10:25:02

Johnny 发表于 2016-9-2 15:42
得率会非常少

冒昧问一下，这个说法是实践出真知了吗，哭唧唧.....

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