想统计下大家用超速离心时一次用多少量的细胞上清才够用

阿赵

Johnny 发表于 2016-8-27 16:45
细胞上清不能冻存提取外泌体

天呐，可是短时间内没法收集到几十甚至上百ml的上清液呀。请教下前辈这个问题是怎么解决的呢？我已经冻了很久了。

wwpapple

想请教一下，因为实验室没有超高速离心机，用试剂盒提取外泌体的话，提取的量够后续转染或者共培养实验吗？希望有经验的前辈指导一下。十分感谢。

fn65

Naughtyexosome 发表于 2018-7-16 11:47
有没有做过胶质瘤U87，不知道提取量怎么样？

你做了吗，提取量怎么样？你用了多少体积的细胞上清去超离的？
期待你的回复

www2532106

大鹏子 发表于 2017-4-20 10:03
最近做hepG2的外泌体，160mL培养基上清离心下来都看不到沉淀

你好 那你现在还做这种细胞吗？

Naughtyexosome

有没有做过胶质瘤U87，不知道提取量怎么样？

44267085

好难啊，，，，

a969539915

luckkit 发表于 2015-4-24 12:38
另外，请教一下，俺是收集上清后直接2000g 30min,然后0.22um过滤，10e4 30min, 10e5 2hrs, 开始没有300g 10 ...

应该是为了去掉还没死的细胞和细胞碎片，毕竟外泌体也是磷脂双分子层结构跟细胞膜相似，可能会对后期定量造成影响。

外泌体怎么ti

这个是不是跟细胞数量有关？

滴哩嘟噜1217

我用的是293T细胞，培养收集培养基，准备超速离心制备外泌体？现目前不解的问题有三：
1、正常培养细胞密度到达80%左右之后，必须得换无外泌体的血清培养基，是否可以直接用OPTI-MEM培养基?
2、我们用的超速离心机是beckman的，一次最多6^38.6ml,收集培养基》200ml，你们一般是怎么保存的呢？
3、电镜分析的时候你们是用的什么电镜呢？对样品制备有什么要求呢？有具体的步骤分享吗？谢谢

yangdudu

楼主是否可以统计超速离心方法需要多少血液？谢谢你。