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发表于 2015-4-23 10:36:36 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式
本帖最后由 hzangs 于 2017-7-11 15:54 编辑

大家好,我是johnny的舍友。上次交流我说给大家展示一下自己的电镜图,所以现在贴一下给大家看~
这张看上去有点模糊,可能是放大倍数的关系…   基本上还是比较接近典型的形状。 我也有大个头的,就像第二个图,但大部分都是100nm一下的。
版权所有,请勿转载或发表使用,谢谢
制样:
40ml 培液超速离心分离得到的外泌体,重悬于20-30ul PBS中。
吸取样品10ul 滴加于铜网上沉淀1min,滤纸吸去浮液,
吸取2%的醋酸双氧铀10ul滴加于铜网上沉淀1min,滤纸吸去浮液,
常温干燥数分钟。上机

80kv-120kv 成像

      

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发表于 2015-4-24 15:53:02 | 只看该作者
同问具体负染了什么,谢谢!
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 楼主| 发表于 2016-3-29 09:56:32 | 只看该作者
xinyi717 发表于 2016-3-28 20:33
请问一下 pbs 是买的公司的吗,感觉自己配的1xpbs 会有杂质呢,感觉影响观察~谢谢 ...

自己配的。  你要感觉有杂质   就过一下0.22的滤器。
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发表于 2015-4-23 21:34:39 | 只看该作者
问一下 负染的 染料是什么啊
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发表于 2015-4-23 11:30:31 | 只看该作者
好赞,求TEM制样过程,大神!!!!
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 楼主| 发表于 2015-4-23 11:35:45 | 只看该作者
effiezhang66 发表于 2015-4-23 11:30
好赞,求TEM制样过程,大神!!!!

exosomes样品10ul 铜网上沉淀1分钟,吸水纸吸去多余液体;负染1分钟,吸水纸吸去多余液体。上机 。
应该是80kv电压。

ps:@johnny 我看了一下,我真的是80Kv打的电镜
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发表于 2015-4-23 11:40:25 | 只看该作者
hzangs 发表于 2015-4-23 11:35
exosomes样品10ul 铜网上沉淀1分钟,吸水纸吸去多余液体;负染1分钟,吸水纸吸去多余液体。上机 。
应该 ...

这样的样本可以储存吗?因为是在别的单位约电镜的
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 楼主| 发表于 2015-4-23 11:42:33 | 只看该作者
effiezhang66 发表于 2015-4-23 11:40
这样的样本可以储存吗?因为是在别的单位约电镜的

我打过4°保存几天的样品。 这样的样品 打出来的exosomes 容易抱团,但是还能凑合用,能挑到可以上figure的。
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发表于 2015-4-23 11:49:10 | 只看该作者
大神,求问10ul的重悬液是PBS吗?
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发表于 2015-4-23 11:49:34 | 只看该作者
大神,求问10ul的重悬液是PBS吗?
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 楼主| 发表于 2015-4-23 11:51:36 | 只看该作者
effiezhang66 发表于 2015-4-23 11:49
大神,求问10ul的重悬液是PBS吗?

是的。 我将大概2000万 tumor cell 分泌的exosomes 用30ul PBS 充分重悬的。
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发表于 2015-4-23 12:37:28 | 只看该作者
谢大神!!!
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