外泌体之家 | 细胞外膜泡领域核心平台—exosomes & microvesicles—小膜泡大作用

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楼主: hzangs
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发表于 2018-5-22 16:16:05 | 只看该作者
hzangs 发表于 2018-5-22 09:58
确实有这么做的。 有人说多聚甲醛固定一下效果好。其实我认为,只要你的样品外泌体颗粒足够多,样品足够 ...

好的,多谢老师。 我也是需要把样送出去打电镜,公司这样要求。
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发表于 2018-5-22 16:57:31 | 只看该作者
外泌体有没有测过浓度?我都是BCA法测的浓度,但是做电镜时不知应该稀释到多少浓度合适
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 楼主| 发表于 2018-5-27 20:39:31 | 只看该作者
pudding 发表于 2018-5-22 16:57
外泌体有没有测过浓度?我都是BCA法测的浓度,但是做电镜时不知应该稀释到多少浓度合适
...

超离的话,没必要稀释。试剂盒的话考虑稀释到  最多几微克每微升  吧
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发表于 2018-6-5 14:35:59 | 只看该作者
请问老师,用超速离心提取的话,在两次100,000×g离心之间,倒掉上清之后,要加多少的PBS重悬呢?我是有4个管,每个管加了1mlPBS重悬,再加到一个离心管中,再加PBS基本填满离心管,这样的步骤您觉得可以吗???
还有老师,因为我一次性不能收集足够多的细胞上清液,所以把收集的上清液放在-80℃中,再进行提取,您觉得可以吗?
因为是新手很多不懂,还请老师赐教,谢谢老师啦。
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 楼主| 发表于 2018-6-8 18:54:00 | 只看该作者
最好一次搞定,不要冻。我们的尝试是感觉冻过之后  效果不太好。  短时间放4°即可
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 楼主| 发表于 2018-6-8 18:54:31 | 只看该作者
hjj 发表于 2018-6-5 14:35
请问老师,用超速离心提取的话,在两次100,000×g离心之间,倒掉上清之后,要加多少的PBS重悬呢?我是有4 ...

最好一次搞定,不要冻。我们的尝试是感觉冻过之后  效果不太好。  短时间放4°即可
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发表于 2018-8-23 07:42:09 | 只看该作者
大神,我这边实验老师说固定之后复染观察效果好,是这样吗?但是实验室要求自己固定好,固定起来好麻烦,主要是已经提好外泌体了,固定的试剂还没买,盼您解答一下
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发表于 2018-9-14 14:34:50 | 只看该作者
请问2%醋酸双氧铀如何配置呢 用灭菌水吗
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 楼主| 发表于 2018-9-15 15:13:06 | 只看该作者
xjxahh 发表于 2018-8-23 07:42
大神,我这边实验老师说固定之后复染观察效果好,是这样吗?但是实验室要求自己固定好,固定起来好麻烦,主 ...

确实固定一下效果可能更好。 但是负染一下就足够了
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发表于 2019-3-12 11:47:25 | 只看该作者
我想问一下电镜前,外泌体悬浮液不用做负染色吗?还有,您使用的电镜仪器的型号是JEM-1200EX吗?期待您的回复,谢谢!
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