外泌体蛋白定量

落叶知秋

我用试剂盒抽的10ml全血中的外泌体，RIPA裂解液1:1裂解后，BCA测浓度，0.3-1.2ug／ul，绝大部分集中在0.8左右，应该还可以。

落叶知秋

meiling 发表于 2017-9-3 14:20
请问你裂解的时候加PMSF 了吗？

加PMSF或者Cooktail，虽然总蛋白还算可以，但是目的蛋白量比较少。

落叶知秋

vvvv 发表于 2017-8-30 11:44
请问你使用RIPA裂解液裂解了多久？如果提取蛋白的话外泌体提取液一定要裂解是么？
...

那就要看看你的蛋白定位在哪里了，如果是膜蛋白的话就不太需要，例如：Identification of Developmental Endothelial Locus-1 on Circulating Extracellular Vesicles as a Novel Biomarker for Early Breast Cancer Detection。如果不是膜蛋白，理论上应该要裂解的，裂解的方法有很多，我试过RIPA，也是过自己配的裂解液加超声。