有用DIL染料标记外泌体，观察细胞摄取实验的么？

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DIL直接混合染色，随后100KD浓缩管洗涤（从上方多次加入PBS后离心），5-6遍后回收浓缩管里残余的溶液做uptake实验，亲测，好用！

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wwpapple 发表于 2020-1-7 09:12
您好，想请问一下，您用DiI标记过的外泌体有放冰箱储存备用吗？就是标记完可以先储存着，等到用到的时候 ...

外泌体是-80 分装冻存的，Dil染色后（冰上30min）转移到浓缩管，PBS洗后直接感染靶细胞。是标记后立马用，外泌体是不能反复冻融的（膜结构易破）

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小黄人 发表于 2020-1-17 10:09
你好，请问下感染靶细胞您是感染多久呢？外泌体与DiI染色时外泌体有浓度要求吗?与DiI的配比是多少呢？实 ...

我做的是感染靶细胞4小时，随后弃去上清换成培养基，12h或24h即可荧光观察！外泌体浓度我没测，我取20ul用PBS稀释到1ml，加入1ul DIL（DMSO配制1mg/ml）冰上染色20分钟，后面就是浓缩管反复洗涤去除多余DIL，最后再用少量PBS洗一下管内壁，吸出来就是DIL标记的外泌体，后面与DMEM混合就可以感染靶细胞。