一种区分细胞外膜泡和逆转录病毒的方法

Johnny · 发表于 2017-12-26 23:20:05

逆转录病毒和小细胞外膜泡的尺寸、浮力密度、折射率等参数相似，并且拥有许多相同的细胞来源的表面标记，使得它们几乎无法用标准的生化方法区分。当纯化用于下游分析的逆转录病毒或对病毒体上的标志物进行表型特征研究时，细胞外膜泡是逆转录病毒制剂的主要污染物。纳米流式细胞术（NFC）也称为fow virometry，是用于分析单个纳米颗粒，如细胞外囊泡（EV）和逆转录病毒的流式细胞术技术的改进。这项研究系统地优化了NFC参数，用于检测115-130nm范围内的逆转录病毒颗粒，包括病毒生产、样品标记、激光功率和电压设置。通过使用逆转录病毒包膜糖蛋白作为选择标记，评估一些荧光染料和标记方法，证明有可能通过NFC从EV中区分出逆转录病毒。该研究结果可以从混有EV的逆转录病毒颗粒中表征表达荧光包膜糖蛋白的基因修饰的逆转录病毒颗粒。

图. 通过结合膜和核酸的染色从Evs中区别出病毒颗粒

该方法对区分具有相同尺寸大小的病毒和细胞外膜泡具有十分重要的意义。但该方法区分逆转录病毒和EV的方法的仍有局限性，仅限于使用具有荧光包膜糖蛋白的基因工程病毒，例如在细胞系或动物模型中的研究应用。

参考文献：

Tang VA, Renner TM, Fritzsche AK, Burger D, Langlois MA. Single-Particle Discrimination of Retroviruses from Extracellular Vesicles by Nanoscale Flow Cytometry. Sci Rep. 2017 Dec 19;7(1):17769. doi: 10.1038/s41598-017-18227-8.

附件已隐藏，回复该贴可查看附件

游客，如果您要查看本帖隐藏内容请回复