外泌体浓度非常非常低

芮苏遥

1.沉淀量？拍个照更好参考
2.细胞量多少？或者说培养瓶或皿的细胞密度？
3.细胞类型会影响外泌体产量

芮苏遥

husthuagai 发表于 2018-1-5 17:03
1.下次做的时候拍照上传给您看下
2，用的15cm的培养皿，都是长到70%左右换成去外泌体的培养基，然后48h， ...

细胞状态可以的话，尝试增加开始收集上清细胞密度（90%左右）和收集时间（我有试过最长96h的）。
15cm dish 我加12ml上清，试过life 试剂盒和超离，200ml上清超离所得沉淀我大概用了200ul重悬
还有微膜过滤步骤是必须的吗，会不会过滤损失掉？还有不清楚过滤会不会影响外泌体结构稳定

芮苏遥

SYSUCC-Deng 发表于 2018-1-7 23:56
15cmdish才加12ml培养基吗？太少了吧。

还试过9ml，12ml 48h是可以的~延长时间的话，局部就容易干掉了

芮苏遥

外泌体小天使 发表于 2018-4-16 13:57
楼主，请问你的问题解决了吗，外泌体浓度上来了吗？怎么解决的，说下，谢了。 ...

sorry，太久没上来看消息。外泌体浓度跟细胞自身产量有关，我这个基因刚好抑制RAB家族，释放量就会减少，跟对照相比同样处理，离心后就是小小颗沉淀。如果超速离心的话还好，可以合并重悬，试剂盒的话就比较费钱了

芮苏遥

425612liyuan 发表于 2019-7-18 13:22
后来用了什么方法提高产量的

后来就没有后来啦，因为毕业了。不过现在要重新开始相关课题了。我jio得可以试试挤压制备和牛奶外泌体包装