BCA测蛋白浓度问题

六月の雪

楼主也做胰腺癌？同道中人啊
我用的SBI试剂，用PBS重悬后，取个10-20ul出来加裂解液（因为剩下的还想着孵育其他细胞观察个现象啥的）
BCA测浓度，裂解液不敢加多了，第一次做都是尝试，我用了30ul裂解液（我现在觉得加10ul裂解液都够了= =），测的蛋白浓度挺低的，
这个貌似没有成熟方案吧，都是摸着石头过河，有结果就成~

六月の雪

kadak007 发表于 2015-5-29 17:56
终于碰到同道了，幸会幸会啊    我打算下周BCA下
你是用多少体积培养上清提取啊？然后加pbs多 ...

40多ML的上清，用超滤管浓缩到5mL，再加SBI试剂过夜才能看到肉眼可见的沉淀，加了200ulPBS重悬，约了下周做电镜，裂解液是长期合作的一家国产公司自配自卖的，不算是什么品牌