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SBI Exo-Quick TC提取血清exo经验与困惑

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发表于 2015-7-7 17:03:39 | 只看该作者 回帖奖励 |正序浏览 |阅读模式
SBI的Exo-Quick有两种,一种就是Exo-Quick,说明书提示用以提取血清exo;还有一种是Exo-Quick TC,用以提取培养基或尿液exo。
我在想,培养基不就是10%FBS+DMEM之类的么,那么我如果用PBS(或DMEM、IMDM)稀释血清,制造一种类似培养基的东西,然后用Exo-Quick TC是否可以提取了呢?


抱着试试看的态度,我选择了Exo-Quick TC。
取100ul小鼠血清(分别为sham和心梗小鼠),用400ul PBS稀释,得500ul mix。加入100ul Exo-Quick TC,此时立即出现浑浊(什么情况?)
Anyway,继续做 。4度静置40min左右,1500g*30min离心,见EP管底部有较多白色沉淀。再用200ul PBS重悬吹打,得清亮、透明混合液。


鉴定不打算做了,直接做表征。观察其对靶细胞是否有作用。
欲知后事如何,且听下回分解。

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发表于 2021-1-8 17:36:28 | 只看该作者
Johnny 发表于 2015-7-7 17:10
立即出现浑浊是因为你稀释的血清里面蛋白和盐离子的成分过高。如果将细胞培养上清浓缩高倍数后用Exo-Quick  ...

请问 我两倍稀释血清 差速提MVs时,20000g 40min后管壁也是有白色沉淀 一晃就散 单独洗出来吹打可消失 这也是这个原因吗
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发表于 2020-3-16 18:33:11 | 只看该作者
如果纯度不够 可以用外泌体的专业纯化柱,纯度更高,提取速度更快。欢迎联系Q1813061338
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发表于 2020-1-14 17:17:36 | 只看该作者
谢谢分享!
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发表于 2019-11-6 21:55:47 | 只看该作者
hj978 发表于 2019-11-6 21:52
问一个问题,为什么我看见好多人提取血清外泌体使用Exo-Quick TC,而不是Exo-Quick LP呢 ...

Exo-Quick LP是专门用来提取血清或血浆的,Exo-Quick TC用来提取尿液等的,为什么血清也会使用Exo-Quick TC,我看见不止一篇是这样用的,Exo-Quick LP使用很麻烦,我也想用Exo-Quick TC提取血清外泌体,但是不知道具体缘由
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发表于 2019-11-6 21:52:55 | 只看该作者
问一个问题,为什么我看见好多人提取血清外泌体使用Exo-Quick TC,而不是Exo-Quick LP呢
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发表于 2019-10-28 15:14:08 | 只看该作者
后来就没有然后了?
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发表于 2019-3-8 17:56:28 | 只看该作者
全是杂志,外泌体有,全被99.9%的杂志掩盖了
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发表于 2018-12-10 12:52:22 | 只看该作者
想请问最后做出来有成功吗?
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发表于 2018-10-19 09:59:42 | 只看该作者
Johnny 发表于 2015-7-8 21:03
不能变透明的话,就提不出来了,因为把蛋白全部沉淀了,整个体系一般都是固体 ...

您好,我最近用SBI试剂盒提取外泌体,提取试剂加进去后液体变浑浊,混匀后也不是特别澄清,提取后沉淀都是红色,胶冻状。按照您说的是因为细胞培养上清浓缩倍数太高造成的吗?那一般都多少倍浓缩比较合适呐?我的样品很珍贵,还有补救的办法吗?请赐教,万分感谢。
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