有囊泡相关技术问题请在该贴留言！

仙逆清水

各位前辈好，有个外泌体LncRNA验证的问题想咨询一下，由于外泌体测序的时候用光了两个样本RNA，现在qPCR验证的时候就少了两个样本，请问这时候能用其他的样本替代吗

hzangs

Mr-summerr 发表于 2020-1-16 14:42
hzangs老师你好，想请教下既然去年那篇文献Reassessment of Exosome Composition证明dsDNA是直接排到细胞外 ...

去年那篇文章只能说  DNA可能不在囊泡中。  如果你关注一下这个领域就会发现，前段时间 又出了一篇大文章。  介绍 肿瘤来源的外泌体  确实会有大约10%左右 携带有DNA。

hzangs

仙逆清水 发表于 2020-1-18 17:04
各位前辈好，有个外泌体LncRNA验证的问题想咨询一下，由于外泌体测序的时候用光了两个样本RNA，现在qPCR验 ...

如果是细胞系的话  还好。 再收一次外泌体，测qPCR 能部分说明问题。  如果是人样本的话   那就不好办了

骑在银龙背上

请问用qiagen的exoEasy试剂盒提取的外泌体直接共孵育好像因为XE洗脱液的问题对细胞有损伤，用什么办法能将外泌体置换到PBS中呢？

changlong

冻存3-5年的血清样本提外泌体的效果怎么样呢，谢谢

hzangs

骑在银龙背上 发表于 2020-1-21 15:37
请问用qiagen的exoEasy试剂盒提取的外泌体直接共孵育好像因为XE洗脱液的问题对细胞有损伤，用什么办法能将 ...

这个问 他们的技术人员。  我们没有进行过相关尝试

hzangs

changlong 发表于 2020-2-1 17:27
冻存3-5年的血清样本提外泌体的效果怎么样呢，谢谢

只要没反复冻融过， 基本不会有什么问题。

仙逆清水

hzangs 发表于 2020-1-21 10:16
如果是细胞系的话  还好。 再收一次外泌体，测qPCR 能部分说明问题。  如果是人样本的话   那就不好办了 ...

老师 你好  我用的是人类尿液样本，那两个样本用完后，现在只能用别的样本来代替，不知道这样行不行

hollychao

请教hzangs大神~做ELISA测外泌体内的蛋白之前，是样本（外泌体悬浮液）和RIPA=1：1来裂解外泌体的吗的吗？裂解后需不需要离心取上清液呢？非常感谢~

hzangs

hollychao 发表于 2020-6-9 20:44
请教hzangs大神~做ELISA测外泌体内的蛋白之前，是样本（外泌体悬浮液）和RIPA=1：1来裂解外泌体的吗的吗？ ...

抱歉，这个真没做过。 但是按照你的描述来说， 没什么问题，你可以按照细胞质中蛋白的 ELISA 方法 来操作
。