血浆和细胞上清外泌体浓度差异问题

微泡biomarker

最近在同时做血浆和细胞上清来源你的外泌体，但是NTA结果显示，血浆外泌体的浓度要高于细胞上清，甚至高一个数量级，原因不明，待解释，请教一下同行们，有没有做的？交流一下经验。

Annemarie416

楼主，我想问一下，你是用的肿瘤病人的血浆吗？一般用几毫升提外泌体？
离心完之后，可以看到明显沉淀吗？
谢谢

zhouyuos

首先，你是用什么方法提取的，有没有经过纯化的步骤。
其次，NTA的结果，是不是血浆提取的粒径小一点。
最后，TEM看一下，应该是血浆里面的蛋白没有去掉。

微泡biomarker

zhouyuos 发表于 2018-8-21 22:33
首先，你是用什么方法提取的，有没有经过纯化的步骤。
其次，NTA的结果，是不是血浆提取的粒径小一点。
最 ...

首先，都是超速离心的方法。蔗糖梯度密度离心纯化，估计有损失，而且很大。
其次，血浆提取的粒径和细胞的差不多。
最后，TEM需要排队，暂时做不了。
总结，是不是一般都细胞上清中的多一些，而血液中的相对少呢？

nixiao

楼主，您好，我最近在提细胞上清，也是发现外泌体的量太少了，达不到后期做蛋白组学的量的要求，楼主有没有提过成纤维细胞的外泌体呢？

微泡biomarker

nixiao 发表于 2018-8-23 16:24
楼主，您好，我最近在提细胞上清，也是发现外泌体的量太少了，达不到后期做蛋白组学的量的要求，楼主有没有 ...

这个真没有，我们都是肺癌的细胞。