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外泌体免疫金标电镜做得失败,求助大家

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发表于 2018-12-9 17:23:52 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式
我是按照thery阿姨2006年的免疫金标方法做的,就是电镜下看到的外泌体破破烂烂的,这是为什么呢?求助大家,做了好几次还是这样,难过(ಥ﹏ಥ)

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沙发
发表于 2018-12-9 17:51:51 | 只看该作者
外泌体破裂,可能是分离纯化的时候操作造成的。   而不是后续实验造成的。   另外 我认为你这个凑合了,找找比较好的图  能够出figure就好
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 楼主| 发表于 2018-12-9 18:32:33 来自手机 | 只看该作者
hzangs 发表于 2018-12-9 17:51
外泌体破裂,可能是分离纯化的时候操作造成的。   而不是后续实验造成的。   另外 我认为你这个凑合了,找 ...

我之前不做金标的时候,是一样的离心分离步骤,看电镜外泌体基本安好,就是做金标形态就不大好,毛毛糊糊的,有没有可能是多聚甲醛固定过夜,或者最后用戊二醛固定的不好造成的呢?
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 楼主| 发表于 2018-12-9 19:14:30 来自手机 | 只看该作者
hzangs 发表于 2018-12-9 17:51
外泌体破裂,可能是分离纯化的时候操作造成的。   而不是后续实验造成的。   另外 我认为你这个凑合了,找 ...

或者是我离心合并的时候每次吹打次数不定,或多或少,因此造成的外泌体形态时而好时而不好,老师,这个原因比多聚甲醛和戊二醛的原因更有可能吗?
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