DiR外泌体体内示踪

SYSUCC-Deng · 发表于 2019-7-2 10:38:22

请教：我想看肿瘤细胞外泌体体内的器官摄取定位，超速离心提取外泌体，取40ug外泌体用PE的DiR标记半个小时，然后用invitrogen的MW3000外泌体过滤柱洗涤（宋尔卫教授文章xtracellular vesicle-packaged HIF-1α-stabilizing lncRNA from tumour-associated macrophages regulates aerobic glycolysis of breast cancer cells用过），然后小鼠尾静脉注射，12h后用布鲁克拍摄ex-vivo照片，如图：是不是能说明外泌体都聚集在肝脏，不在肺？还是说有可能是在肝脏里边代谢了？

hzangs · 发表于 2019-7-2 20:00:03

仅有这一个实验你说的哪两种可能都存在。但看你自己想怎么解释了。

baishixiaoyaozi · 发表于 2019-7-2 21:25:42

时间点也很重要吧。
比如尾静脉注射后1小时取样，结果肯定和12小时后取样不同。

SYSUCC-Deng · 发表于 2019-7-2 22:55:50

谢谢两位的意见！我看文献多的是尾静脉注射后12h跟24h拍荧光

cui_0029 · 发表于 2020-2-28 13:47:04

请教：你好，请问您是直接把DIR标记的外泌体经尾静脉注射12h之后拍的荧光吗？还有没有其他的处理？因为我们也这样做过一次，用的活着的小鼠（没有把器官取出来拍），但是老师说小鼠本底荧光比较强，看不出来exosome的荧光，我们是注射完2h去拍的，也有可能是因为还没有完全和细胞膜结果导致信号不强。您有没有好的建议，谢谢！

cuifeng1127 · 发表于 2020-2-28 14:28:09

https://mp.weixin.qq.com/s?__biz ... 7&lang=zh_CN#rd

cui_0029 · 发表于 2020-3-2 21:06:53

cuifeng1127 发表于 2020-2-28 14:28
https://mp.weixin.qq.com/s?__biz=MzIyNjQ2Mjc5Ng==&mid=2247484422&idx=1&sn=121e4106f59d64dc83fe41d2cb ...

看了好多文献都说是微克级别的外泌体注射，请问200ug外泌体是用什么来量化的呢，是以外泌体内的蛋白含量为标准吗？请大家赐教！！！

zj121960 · 发表于 2021-12-2 20:02:55

cui_0029 发表于 2020-3-2 21:06
看了好多文献都说是微克级别的外泌体注射，请问200ug外泌体是用什么来量化的呢，是以外泌体内的蛋白含量 ...

请问您明白微克的量是怎么回事了吗

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