PKH67染色

wjy

wanghx_85 发表于 2016-1-21 11:59
我也不知道哪里出问题了，提了外泌体之后我就用100ulPBS重悬，然后开始PKH67染色，方法是：100ul Diluent C ...

我也做过这个实验，也是sigma的pkh26(红色膜染料)。我是先取1ulpkh26膜染料与100ulexo先孵育增加结合效率，然后加入1ml的 Diluent C，加入200ul1%BSA/PBS（我理解的加入200ul1%BSA/PBS的目的不是的终止反应，是增加连接效率，封闭非特异性的）。然后再体系中加入3ul的PKH26染料室温孵育20min,1h20min,10,0000g超速离心。获得的沉淀用100ul重悬。标记好的exo与细胞共孵育后再共聚焦显微镜下可以看到exo uptake cell