Izon公司qEV exosome分离柱试用总结

hzangs · 发表于 2015-9-11 11:19:13

本帖最后由 hzangs 于 2015-9-22 11:35 编辑

相信论坛里有些朋友还是知道这个qEV的分离柱的，最近很好奇，所以找闫经理要了两个做试用。尝试解决上样量低的问题。目前我将培液从50ml浓缩到了1ml。
昨晚上样了500ul过柱分离，今早测了一下蛋白浓度，分离得到了的exosome测了一下蛋白浓度。大概收到了15ug的exosome蛋白。准备过后跑个WB 杂一下marker试一下，再去测个粒子浓度~感觉不错。

说说总体感觉： 1、比较方便 PBS当做buffer 柱平衡大约10分钟不到。上样洗脱分离大概5分钟，处理回收柱子（柱子可以反复使用多次的）大概10分钟。柱分离步骤用掉大约30分钟。前期培液10000g去除死细胞碎片大约30分钟，超滤管浓缩培液大约20分钟，后期浓缩分离得到的exosome大约3分钟。总体算下来收25ml培液的exosome总体耗时90min。最关键是感觉比超速离心要省心省力。2、操作比较容易，不需要太多的技术，只要开着洗脱液一滴一滴的出来就行了。3、需要的试剂简单，只需要PBS做buffer就可以了。感觉很简单。
后面数据出来之后再和大家分享。如果效果好的话我会个大家秀图，秀流程，同时翻译izon qEV的说明书。

ps：突然感觉自己的生产力被解放了

Johnny · 发表于 2015-9-11 17:24:34

棒棒哒~~~~~~~~~~~~~

kasangzc · 发表于 2015-9-11 18:57:35

坐等你的好结果，超离简直神烦

hzangs · 发表于 2015-9-11 19:12:15

本帖最后由 hzangs 于 2015-9-11 19:13 编辑

kasangzc 发表于 2015-9-11 18:57
坐等你的好结果，超离简直神烦

我也是备受超离之苦的人…… 这次的试用经历简直惊艳，就是不知道质量如何。待我测了粒子数和WB 再向大家汇报~ 哈哈

itooth · 发表于 2015-9-12 12:21:19

超离什么的炒鸡烦等候楼主佳音

惜名 · 发表于 2015-9-13 15:29:51

太赞了~~
今年一篇JOEV认为qEV的优于SBI呢

hzangs · 发表于 2015-9-13 19:05:35

惜名发表于 2015-9-13 15:29
太赞了~~
今年一篇JOEV认为qEV的优于SBI呢

这个我还真没看到paper。
但是试用下来给人的感觉就是简单并且节省时间。正在做wb鉴定，并且送样去测粒子数了。大家坐等我的data哈。不管试用结果如何，我到时候都会发个帖子来秀一下数据。

惜名 · 发表于 2015-9-14 08:57:10

hzangs 发表于 2015-9-13 19:05
这个我还真没看到paper。
但是试用下来给人的感觉就是简单并且节省时间。正在做wb鉴定，并且送样去 ...

hzangs · 发表于 2015-9-14 13:17:52

鉴定数据出来一部分了。先给大家透露点，结果很不错，western鉴定结果可以用amazing来形容。具体的数据我会在后期汇总后发送到论坛上供大家参阅。

惜名 · 发表于 2015-9-15 08:49:16

hzangs 发表于 2015-9-14 13:17
鉴定数据出来一部分了。先给大家透露点，结果很不错，western鉴定结果可以用amazing来形容。具体的数据 ...

哇塞！！！
求高清图~
QQ上那张图片太小，看不清楚~

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