吉林长春+急求Beckman SW 41 Ti 离心管+

hzangs

我没有这个超离管，但是我目前在试用一款分外泌体的分离柱。根据文献报道，它分出的外泌体还是挺纯的，电镜图也挺好看 没有什么杂质。
如果方便，你可以把样本给我，我帮你分外泌体出来。   
请问楼主是哪个城市的？

hzangs

惜名 发表于 2015-9-16 08:12
qEV提的电镜图如何？

qEV电镜图   你可以参考那篇paper啊    我还没有用qEV的exosome打电镜呢    毕竟我已经有上paper的图了 不急打  哈哈

hzangs

敢问楼主超离分离过exosome么？  还是有难度的哦  当年我奋斗了4个月超离  才看到沉淀哦   

其实我就是想找个人   我来用柱子分离exosome 别人给打个电镜 分享张图给我

hzangs

好时之梦 发表于 2015-9-16 11:53
没啊，以前都是用SBI的试剂盒提的。用超离的话应该注意什么呢，我明天准备做呢，望大神指点。我这儿方便 ...

超离分离外泌体的一个很大问题是 外泌体沉淀很少，容易漂走 还不容易看到。。。。 一不留神 吸上清的时候 可能就把外泌体吸到废液缸了  o(╯□╰)o

hzangs

好时之梦 发表于 2015-9-16 11:53
没啊，以前都是用SBI的试剂盒提的。用超离的话应该注意什么呢，我明天准备做呢，望大神指点。我这儿方便 ...

能免费帮忙打个电镜么

hzangs

好时之梦 发表于 2015-9-16 13:08
可以，你的样品浓度得调好，可以直接上样。样品保存和邮寄怎么办

样品邮寄之类的钱我自己搞定就行

hzangs

好时之梦 发表于 2015-9-16 13:16
吉林省长春市南关区自强街218号吉大二院2号楼10楼放疗科 孟祥宽 18844501822

我是上海这边的，上海生科院。我可能需要一段时间以后才可以。现在手里的样品没有新鲜的，都是在4°放了1周的。 半个月后可以么？

hzangs

好时之梦 发表于 2015-9-16 15:35
可以。超离用PBS重悬后什么温度保存最好啊

有些paper里说 高浓度的exosomes可以在PBS里重悬后放在4° 保存1星期左右，也有paper说可以-80长时间保存。 我们实验室的小老板曾经去一个做exosomes的大牛实验室，那边是不提倡保存的，都是现用现制备的。
我打过放在4°一星期样品的电镜，打出来也可以看到exosomes，但是很多exosomes会粘连在一起。

hzangs

好时之梦 发表于 2015-9-16 16:10
你用超离做过血清吗，据你所知，做血清要不要用PBS稀释啊

那边实验室所有实验用的exosomes都是现用现做。我一般最多把exosomes放在4° 48小时，超过48小时的我就用了。

我只用超离制备过exosomes-free FBS ，没有稀释，直接超离过夜。没有研究过血清中的exosomes

hzangs

好时之梦 发表于 2015-9-16 17:32
超离过夜？细胞培养上清超离时需要多长时间啊，有的文献说70min，有的说2h。 ...

去除血清中的exosomes 通常需要超离过夜。 细胞培养上清 70min即可