exosome提取RNA的方法

木瓜31

Johnny 发表于 2014-11-5 09:59
我用的Trizol的方法，exosome里的RNA量确实很少，1mL上清大概只能得到10ng左右的exoRNA ...

请问用trizol法提RNA，exosome-PBS重悬液和trizol的体积按怎样的比例？

木瓜31

Johnny 发表于 2014-11-6 09:48
最好是将trizol直接加到超速离心或者试剂盒得到的exosome pellet中。加到exosome-PBS中会影响trizol的效 ...

我用的是101bio的kit，终产物是exosome-PBS混液啊。。。请问，那如果是加到exosome pellet，要加多少trizol呢?

木瓜31

Johnny 发表于 2014-11-6 10:10
这样。。。。。。exosome pellet的话，加0.5或1mL就好

谢谢~如果把混液当做液体样本，也许可加trizol LS试试。另外还想请教一个问题，PCR时exosomal miRNA的内参应该选择什么？和一般miRNA内参一样吗？

木瓜31

惜名 发表于 2014-11-17 10:21
前段时间我咨询过101bio的技术人员，他建议使用几种内参（但具体我忘记了，QQ的信息保存功能真是太差劲了 ...

我也问过他们这个问题，建议“cel-miR-39-3p,SNORD61 ,SNORD68,SNORD72”这几个内参，不过还得视exosome来源而定。