qEV分离柱 - 实战试用报告

hzangs · 发表于 2015-10-30 18:42:44

本帖最后由 hzangs 于 2015-10-30 18:45 编辑

wxhljq 发表于 2015-10-30 18:06
前天用了一次qEV柱，分离的血清外泌体，电镜下看还不错。今天本想再来一次，但是透过灯光看柱子，内部有10- ...

能分享一张电镜图给我么？放在我的这个贴子里

我拿的试用装也看到过，这个应该是装柱的时候出现的问题，不是你使用后产生的。 SEC柱子如果使用中出现洗脱不及时进入空气的话，气泡是很小不会很明显的。

wxhljq · 发表于 2015-10-30 18:57:26

本帖最后由 wxhljq 于 2015-10-30 19:12 编辑

hzangs 发表于 2015-10-30 18:42
能分享一张电镜图给我么？放在我的这个贴子里

我拿的试用装也看到过，这个应该是装柱的时候出现的问 ...

另外所提蛋白含量很低，1.5ml血清，蛋白总量10ug（90ul外泌体裂解液），按说血清当中外泌体含量应该比FBS-free的培养基要高很多才对。western上样3ug，CD63没跑出来，不解。
qEV柱分离外泌体电镜图

丝瓜 · 发表于 2015-10-31 12:38:17

求助楼主，很好奇你的wb方法啊！那么少的量就能跑出条带了。我们的即使用光细胞跑wb上网量都不能那么低，更不用说exosone了。都要上很大的量才能跑出来的。也希望你能分享一下经验啊！！谢谢啦！

hzangs · 发表于 2015-11-1 15:13:55

丝瓜发表于 2015-10-31 12:38
求助楼主，很好奇你的wb方法啊！那么少的量就能跑出条带了。我们的即使用光细胞跑wb上网量都不能那么低，更 ...

这个跟抗体的效价有关系。再有，我用的是HRP的二抗，压片了15min。

丝瓜 · 发表于 2015-11-2 09:22:59

请问楼主2ml的超滤管也是要100kd的孔径么

hzangs · 发表于 2015-11-2 09:26:37

丝瓜发表于 2015-11-2 09:22
请问楼主2ml的超滤管也是要100kd的孔径么

记不清楚了，好像是10KD的

丝瓜 · 发表于 2015-11-2 10:13:17

hzangs 发表于 2015-11-2 09:26
记不清楚了，好像是10KD的

就是孔径是比大的超滤管更小么？~

咏咩咩 · 发表于 2015-11-4 22:14:35

楼主大人..请问觉得用qEV来做浓缩后的尿怎么样呢?

hzangs · 发表于 2015-11-5 12:04:37

咏咩咩发表于 2015-11-4 22:14
楼主大人..请问觉得用qEV来做浓缩后的尿怎么样呢?

尿液的成分应该比血浆要简单很多，个人认为浓缩尿液 qEV应该可以对付

haojunshidr · 发表于 2015-11-5 20:25:53

想问下楼主，如果想研究exosomes的microRNA、lncRNA，什么试剂盒比较好？担心超速离心可能会有影响，而qEV似乎对外泌体蛋白研究比较有优势。我如果用qEV，是不是性价比不高

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