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求各位大神帮忙看一下细胞上清外泌体的电镜图片

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发表于 2023-8-17 11:39:05 | 显示全部楼层 |阅读模式
本帖最后由 18547517509 于 2023-8-17 11:42 编辑

我的样本是大鼠肝细胞,120ml上清 120000g离心70min,在用PBS洗1次,然后用100ul的PBS溶好4℃保存,第二天取20uL醋酸双氧铀负染电镜观察。
请问这些是外泌体吗?没有外泌体的典型形态。而且背景很杂,这些大片的杂质是什么呢,杂蛋白?用什么方法可以去除呢

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发表于 2023-8-18 18:23:48 | 显示全部楼层
超高速离心要不要再重复一次,身边朋友做离心提取会做两次,或者提取的外泌体用0.22μm滤器过滤试试?
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 楼主| 发表于 2023-8-20 11:17:44 | 显示全部楼层
zx190214 发表于 2023-8-18 18:23
超高速离心要不要再重复一次,身边朋友做离心提取会做两次,或者提取的外泌体用0.22μm滤器过滤试试? ...

超速离心是做两次,细胞上清离心一次,然后加PBS重悬再超离一次。提取的外泌体用0.22μm滤器过滤这个倒是没试过,但是在超速离心前过了0.22μm滤器。
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发表于 2023-8-21 16:54:03 | 显示全部楼层
18547517509 发表于 2023-8-20 11:17
超速离心是做两次,细胞上清离心一次,然后加PBS重悬再超离一次。提取的外泌体用0.22μm滤器过滤这个倒是 ...

可以试试,或者稍微稀释一下
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 楼主| 发表于 2023-8-25 18:27:59 | 显示全部楼层
zx190214 发表于 2023-8-21 16:54
可以试试,或者稍微稀释一下

好的,这次就打算稀释一下
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发表于 2023-10-7 17:20:46 | 显示全部楼层
本帖最后由 15511958250 于 2023-10-7 17:30 编辑

外泌体图片

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发表于 2023-12-28 12:51:25 | 显示全部楼层
本帖最后由 yxy999 于 2023-12-28 12:55 编辑

请问有人知道这个是外泌体嘛,电镜的老师说可能是病毒

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发表于 2024-1-24 11:39:54 | 显示全部楼层
yxy999 发表于 2023-12-28 12:51
请问有人知道这个是外泌体嘛,电镜的老师说可能是病毒

不是外泌体
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发表于 2024-5-15 17:53:15 | 显示全部楼层
可以用差速超速离心的方式一步步去除死细胞、碎片及大的不溶性蛋白、大囊泡、然后0.22um过滤,再去超高速离心,离心两次,这样子可以减少背景
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