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有没有用过Abcam的CD63抗体,来交流一下WB

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发表于 2014-12-19 16:28:32 | 只看该作者 回帖奖励 |正序浏览 |阅读模式
RT,大家跑WB的时候用的是还原性的loading buffer还是非还原性的loading buffer?
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发表于 2019-10-28 11:49:24 | 只看该作者
langlang007jj 发表于 2014-12-24 10:52
我用的也是Abcam的CD63抗体,之前没注意到要用非还原性的loading buffer,跑细胞总蛋白作为阳性对照三四次 ...

你好同学,你用非还原性buffer跑出来了吗?
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发表于 2019-3-25 19:00:24 | 只看该作者
我用的是这个抗体,结果时好时坏的,有时候的条带很好看,有时候又不行,感觉还是样品的问题,请问一下你是用什么方法提的外泌体,提完之后用的什么方法提蛋白啊,一抗是用什么稀释的?我是用的5%的BSA,可是我看说明书使用0.05%BSA
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发表于 2019-3-19 10:08:18 | 只看该作者
CD63的抗体用了好几个,ABCam的质量最好,novus的也不错,就是R&D的最差。买的时候注意产品是否被其他文献引用过,引用多的就验证得多,效果有保障。
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发表于 2018-11-6 10:31:22 | 只看该作者
Dr.yu 发表于 2017-11-24 11:07
前两天用Abcam的CD63跑了一次细胞的Western,外泌体加裂解液或者不加裂解液都可以,我两个都试了,跑出来的 ...

您好,请问你是用细胞上清还是血清提的外泌体呢?
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发表于 2018-4-17 08:56:19 | 只看该作者
阿赵 发表于 2018-3-20 10:58
请问一下各位,你们的ABCam加CD63和CD9的抗体是用的哪个货号的呀? 新手,第一次做,看了好多文献都没有写 ...

你可以去Abcam官网查询啊,那里都有的,实在不行 你跟艾博抗的技术打电话,让他们给你找,更简单。
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发表于 2018-3-20 10:58:54 | 只看该作者
请问一下各位,你们的ABCam加CD63和CD9的抗体是用的哪个货号的呀? 新手,第一次做,看了好多文献都没有写明。所以求助大家 ,谢谢了。
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发表于 2018-3-4 15:44:48 | 只看该作者
zjm337 发表于 2016-9-26 11:15
你好,我用WB表征外泌体上的CD63,外泌体条带很明显,为什么细胞裂解没有跑出条带??? ...

你好老师,我想问一下我做的结果也是cd63在外泌体中表达而在细胞裂解中表达,我也看了几篇文献,结果也是这样,但是都没有相关的讨论及解释,请问您有相关的文献支持吗,这个问题太困扰我了。
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发表于 2018-1-7 13:53:45 | 只看该作者
vivelarye 发表于 2017-12-22 16:12
请教下,我用的abcam的CD9效果就不好,外泌体没有,细胞有条带。。能分享下你的经验么 ...

我就是标准流程做的,坑能使我们的外泌体不同吧
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发表于 2017-12-22 16:12:39 | 只看该作者
ucsandiego 发表于 2017-12-7 10:53
大神在吗,我也用的abcam的CD63什么都跑不出来,我的cd9也是abcam的效果很好,但是我用的是还原性的loading ...

请教下,我用的abcam的CD9效果就不好,外泌体没有,细胞有条带。。能分享下你的经验么
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