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楼主: Aoterdong
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有没有用过Abcam的CD63抗体,来交流一下WB

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发表于 2017-12-7 12:12:51 | 只看该作者
langlang007jj 发表于 2014-12-24 10:52
我用的也是Abcam的CD63抗体,之前没注意到要用非还原性的loading buffer,跑细胞总蛋白作为阳性对照三四次 ...

您好,您的CD63跑出来了吗,我看见那个抗体说明书也没有说要用非还原条件啊
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发表于 2017-12-7 10:53:11 | 只看该作者
大神在吗,我也用的abcam的CD63什么都跑不出来,我的cd9也是abcam的效果很好,但是我用的是还原性的loading buffer,您现在跑出条带了吗,怎么改进的呢
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发表于 2017-11-24 11:07:21 | 只看该作者
前两天用Abcam的CD63跑了一次细胞的Western,外泌体加裂解液或者不加裂解液都可以,我两个都试了,跑出来的结果一样,至于Loading buffer用普通的就能跑出来,我跑的细胞总蛋白CD63表达很低,趋近于没有
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发表于 2017-11-24 10:18:00 | 只看该作者
大鹏子 发表于 2017-5-19 18:46
你好,请问怎么看抗体需要用还原性还是非还原性的loading buffer呢?

你好,这个问题你得到答案了吗?因为抗体是师姐买的,我不知道。
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发表于 2017-9-25 16:18:58 | 只看该作者
langlang007jj 发表于 2014-12-24 10:52
我用的也是Abcam的CD63抗体,之前没注意到要用非还原性的loading buffer,跑细胞总蛋白作为阳性对照三四次 ...

你好,麻烦请问哈,你试出来了吗?
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发表于 2017-9-25 16:17:48 | 只看该作者
zjm337 发表于 2016-9-26 11:15
你好,我用WB表征外泌体上的CD63,外泌体条带很明显,为什么细胞裂解没有跑出条带??? ...

您好,请问,你用的哪家公司的抗体?
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发表于 2017-5-19 18:46:04 | 只看该作者
langlang007jj 发表于 2014-12-24 10:52
我用的也是Abcam的CD63抗体,之前没注意到要用非还原性的loading buffer,跑细胞总蛋白作为阳性对照三四次 ...

你好,请问怎么看抗体需要用还原性还是非还原性的loading buffer呢?
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发表于 2017-5-10 21:52:30 | 只看该作者

您好,我加loading直接跑的后蛋白几乎成一片了 ,怎么回事?2017-05-09_11-03-21 CD63 ...tif
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发表于 2017-5-6 21:35:35 | 只看该作者
zhixiarensheng 发表于 2017-4-27 20:07
您好,请问您分离出的exosomes是用什么裂解的?需要裂解液裂解吗?还是直接加loading 煮过后跑western bl ...

加loading直接跑。
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发表于 2017-4-27 20:07:40 | 只看该作者
kao3234659 发表于 2017-2-14 06:00
一定要用非还原性,如果PELLET不是很大,最好不要煮样,室温溶解就好。

您好,请问您分离出的exosomes是用什么裂解的?需要裂解液裂解吗?还是直接加loading 煮过后跑western blot
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