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楼主: hzangs

用一百块钱的材料自己制作总价值十几万的SBI试剂盒!

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发表于 2016-4-23 22:26:56 | 显示全部楼层
太嗨了。谢谢!
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发表于 2016-4-26 23:04:15 | 显示全部楼层
确实改善好多
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发表于 2016-4-28 09:40:40 | 显示全部楼层
领教了!
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发表于 2016-5-3 19:20:44 | 显示全部楼层
楼主我试验了一下,可以看见沉淀,我完全按照帖子来的。有几个问题:
1、我采用先沉淀,后收集所有的exosome沉淀超离提纯。这个时候有个问题,PEG会导致上清中的蛋白质变性沉淀,变性的蛋白质会不会被一起超离下来?
2、如果一起被超离沉淀了,那么其实BCA的方法定量exosome量就不准确了。
所以很多文献中提到的使用沉淀法结合BCA定量其实我觉得很不准确,会把大量的蛋白当做exosome一起定量。
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 楼主| 发表于 2016-5-3 19:27:20 | 显示全部楼层
本帖最后由 hzangs 于 2016-5-3 19:28 编辑
lenoch 发表于 2016-5-3 19:20
楼主我试验了一下,可以看见沉淀,我完全按照帖子来的。有几个问题:
1、我采用先沉淀,后收集所有的exosom ...

个人感觉,这个方法只适用于缩小超离体积。 效果可能确实需要好好考察。
但是,这个方法降低了沉淀法分离exosome的成本,绝对是值得借鉴的。  毕竟,现在很多人使用SBI 或者 Life  ,那个价格太狠了。  而PEG完全可以代替,成本下降百倍……当然,想拿到比较纯的囊泡 还是使用其他的分离策略比较好。
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发表于 2016-8-25 10:33:59 | 显示全部楼层
hzangs 发表于 2016-4-18 20:18
PEG6000 已预订。 应该会在明天入手

有没有使用?结果如何啊?
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 楼主| 发表于 2016-8-25 10:55:23 | 显示全部楼层
scar5488 发表于 2016-8-25 10:33
有没有使用?结果如何啊?

有的,在分离板块 有帖子
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发表于 2016-9-2 10:47:25 | 显示全部楼层
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发表于 2016-10-12 20:47:21 | 显示全部楼层
好厉害    重复性如何??
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 楼主| 发表于 2016-10-13 09:30:50 | 显示全部楼层
君扬2009 发表于 2016-10-12 20:47
好厉害    重复性如何??

挺好的。重复过两次。  我通常使用超速离心的
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