求助，从exosome提出RNA后的qPCR.

fengshilou

木瓜31 发表于 2015-9-29 23:58
大家外泌体miRNA定量做得如何呢？我之前根据文献选了一个miRNA(miR-16)作为内参，但是似乎不太理想。。又在 ...

我们目前也遇到了这种情况，就是每次PCR结果相差很大，标本和环境都换了，重复还是每次都不一致。不知道什么原因。

arsenal-xie

wanghx_85 发表于 2015-6-12 08:55
这是我昨天收到的技术支持发给我的文件，关于SBI研究外泌体miR的一些相关设计，感兴趣的可以看一下，我还没 ...

谢谢共享

arsenal-xie

我看文献里也还是使用U6做内参呢。JNCI 2015 107(7) doi:10.1093/jnci/djv135

旋转的尾音

惜名 发表于 2015-9-7 10:06
用过  但是效果并不好。。。
引物是公司帮忙设计的   我没设计过引物

惜名你好~~~想请教引物是哪个公司帮我设计的，求推荐~~~

惜名

旋转的尾音 发表于 2016-9-1 19:55
惜名你好~~~想请教引物是哪个公司帮我设计的，求推荐~~~

我找的biotnt，这家公司在上海貌似做了挺久的，我在他们那里做过好几次，感觉还行，哈哈

旋转的尾音

惜名 发表于 2016-9-3 16:06
我找的biotnt，这家公司在上海貌似做了挺久的，我在他们那里做过好几次，感觉还行，哈哈 ...

有家叫启因的公司，免费给设计合成，免费qPCR验证，我先找他们试试~
之前师兄说 生工也不错的

waimiti

木瓜31 发表于 2015-9-29 23:58
大家外泌体miRNA定量做得如何呢？我之前根据文献选了一个miRNA(miR-16)作为内参，但是似乎不太理想。。又在 ...

请教一下您，您最后的问题解决没？我现在也有同样的困惑，谢谢

zhouxinyu1995

请问下大家我是用的10ml上清，用50kd的超滤浓缩管浓缩到500ul，并且用SBI的外泌体提取试剂盒提的外泌体。过夜后可见很多杂蛋白，用trizol提RNA后，用20ul无酶水溶解，总RNA浓度为50ng／ul，可得到几乎1ug的总RNA，OD值为1.4-1.5左右。请问大家这个RNA会不会太多了，可信吗？

胡杨

你好，你10ng的RNA做出来了吗？因为我提取的RNA浓度也特别的少，你做的时候这个量少不少？

geyulong

您好，请问外泌体中的miRNA是使用什么方法提取的，谢谢了