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楼主: sunshine

BCA定量以及SDS-PAGE前外泌体的处理

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发表于 2019-3-19 09:44:06 | 显示全部楼层
马雪情 发表于 2018-10-24 11:24
需要加裂解液吧,文献报道的结论不一致呢,有些说-80℃冻融后外泌体会破碎,但有些报道结论却说富集的外泌 ...

昨天看到一个帖子中的文献说-80解冻以后外泌体表面的蛋白会从膜上解离进入上清,外泌体体积会增大25%左右。你说的这个-80度六个月形态变化不大是在哪里看的,能不能给个文献。
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发表于 2019-3-25 18:54:02 | 显示全部楼层
有没有小伙伴可以交流经验,实验卡住好久做不出来
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发表于 2019-5-29 14:25:37 | 显示全部楼层
邱邱-- 发表于 2019-3-25 18:54
有没有小伙伴可以交流经验,实验卡住好久做不出来

这个实验先跳过。 可以先做别的实验。这个现在不是很重要
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发表于 2019-6-15 11:13:26 | 显示全部楼层
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发表于 2019-10-20 14:50:04 | 显示全部楼层
hzangs 发表于 2019-5-29 14:25
这个实验先跳过。 可以先做别的实验。这个现在不是很重要

现在还是希望有一个比较好的蛋白浓度用来做质谱,如果蛋白浓度太低,那就需要很大量的细胞上清去提取细胞外囊泡。
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发表于 2020-1-9 14:36:17 | 显示全部楼层
hzangs 发表于 2019-5-29 14:25
这个实验先跳过。 可以先做别的实验。这个现在不是很重要

你好hzangs,我已经弄了电镜和NTA,剩western没弄,但可以先做细胞或者动物,western标志物再慢慢跑是这个意思吗
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发表于 2020-1-9 14:37:27 | 显示全部楼层
hzangs 发表于 2019-5-29 14:25
这个实验先跳过。 可以先做别的实验。这个现在不是很重要

是不是鉴定里电镜和NTA的分量是不是更g高? rg
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发表于 2020-2-29 14:48:20 | 显示全部楼层
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发表于 2020-8-14 16:11:06 | 显示全部楼层
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发表于 2021-12-23 20:02:41 | 显示全部楼层

科研小白,零基础着手外泌体相关,用的BV2小胶质细胞,饥饿处理24h 70ml上清超速离心提外泌体,离心后看到了白色的沉淀,BCA测浓度为0.25ug/ul左右,但是WB什么都跑不出来  想请教下这是怎么回事,是不是没有提出来外泌体
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