血清离心去除外泌体的方法及用该血清配置的培养基的培...

下里巴人 · 发表于 2016-7-22 11:23:35

用细胞培养上清提取外泌体，需用不含外泌体的血清，一般先离心处理血清。文献报道的方法不一，我看到的用的比较多的方法是 110000g，12h。但是没有介绍离心之后具体的处理方法，比如丢弃多少沉淀？可以直接倾倒收集上清吗？还是要用移液器慢慢转移？此外，因为离心血清费时耗力，培养细胞的时候是不是可以先用没有离心的血清配置的培养基培养，在提取前24h or 48h 再换用离心过的血清配置的培养基呢？

请各位大侠不吝赐教！

下里巴人 · 发表于 2016-7-22 20:41:33

自己顶一下！

下里巴人 · 发表于 2016-7-25 11:24:30

再顶！烦请各位老师解答！

下里巴人 · 发表于 2016-7-26 02:01:56

hzangs 发表于 2016-7-25 21:40
我一般是FBS 直接上机超离120000g 14-16h，然后移液器吸取上清留下超离体积10%左右的FBS（血清里的外泌 ...

你提供的信息太有用了，Thank you very much!

下里巴人 · 发表于 2016-7-27 08:52:20

Aurorachen 发表于 2016-7-26 16:00
请问可以先用没有离心的血清配置的培养基培养，在提取前24h or 48h 再换用exo-free血清配置的培养基吗？
...

我觉得可以，hzangs老师应该也是这个意思。

下里巴人 · 发表于 2024-2-6 19:34:07

Laide 发表于 2022-12-14 16:57
您好，我想问一下，超速离心FBS时用开口的管子，然后离心完后0.22滤膜过滤后用来培养细胞会出现细胞污染的 ...

就是你描述的这样子。不知道现在回复算不算晚

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