血清离心去除外泌体的方法及用该血清配置的培养基的培...

hzangs

我一般是FBS 直接上机超离120000g 14-16h，  然后移液器吸取上清 留下超离体积10%左右的FBS（血清里的外泌体会在这部分里）， 上清转移到新管子 再过0.45um的滤器除一次菌。 细胞培养的时候   每次铺50%密度的细胞，然后培养72小时收上清，再直接将细胞按50%的密度传代，这样3天收一次，一直使用exosome free的FBS配置的培液。
含有外泌体的那10%的FBS 不要丢弃，怪浪费的。  你可以用来冻存细胞。 如果你有状态不好的细胞 也可以用这个FBS配置的培液养一养试试，  我师弟曾经尝试过，这剩下的10%的FBS 养细胞 细胞状态可好了！！！

hzangs

下里巴人 发表于 2016-7-26 02:01
你提供的信息太有用了，Thank you very much!

不用客气

hzangs

Aurorachen 发表于 2016-7-26 16:00
请问可以先用没有离心的血清配置的培养基培养，在提取前24h or 48h 再换用exo-free血清配置的培养基吗？
...

可以的。

hzangs

免疫小子 发表于 2016-7-26 20:49
版主老师 你好 鉴于你培养3天的细胞  我觉得还是得看是什么细胞  我体外培养B细胞可撑不到3天  还有就是 ...

要看细胞的。 有些细胞根本养不了那么久  所以就要早点收。 我养的tumor cell  还是可以的。 我是用15cm dish 养的， 3天内不换液。