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【新手必读】外泌体研究背景、方法大汇总

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发表于 2016-7-31 01:05:27 | 显示全部楼层 |阅读模式
本帖最后由 hzangs 于 2017-5-17 12:05 编辑

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近期有很多新入外泌体圈的坛友咨询各种问题,入坑多年的小编们也在坛子里耐心的给大家解答了很多问题,包括前期的外泌体提取、分离纯化、保存等,但是大家还是感觉:

其实,众所周知,外泌体之家拥有许多干货实用的信息,非常适合我们这些勤劳聪慧的粉丝们,所以小编趁周末给大家总结一下,外泌体研究的方方面面~~
1.  什么是外泌体
Exosome,中文名外泌体,是一种能被大多数细胞分泌的微小膜泡,具有脂质双层膜结构,直径大约40-100 nm。尽管外泌体最初在1983年就被发现,但人们一直认为它只是一种细胞的废弃物。然而最近几年,人们发现这种微小膜泡中含有细胞特异的蛋白、脂质和核酸,能作为信号分子传递给其他细胞从而改变其他细胞的功能。这些发现点燃了人们对细胞分泌膜泡的兴趣。2015年,随着精准医学概念的提出,越来越多的人开始关注如何能做到疾病的精确诊断和治疗。外泌体作为一个新型的研究热点,由于它在体内存在的广泛性和获取的便捷性,已经成为了疾病诊断治疗的潜在有效方式,在精准医学发展上有着光明的前景。
2. 外泌体在哪里
外泌体可以从几乎所有种类的细胞分泌,并存在于人体各种体液之中,包括血液、尿液、唾液、乳汁等。
相关研究(点击可详细阅读):
Cell: 体内成像证实外泌体在体内传递的广泛性外泌体大牛Thery的哲学三问:胞外囊泡,你是谁?从哪里来?要到哪里去?Nature:肿瘤遗留在血液里的踪迹——CTC、ctDNA与外泌体康奈尔大学揭示蛋白质通过外泌体进行分泌的新机制
3. 外泌体的提取、纯化和鉴定
每一个外泌体研究者最初都要为外泌体的分离提取而烦恼。首选的分离方式是利用超速离心的方式分离外泌体,并且可以选用梯度密度离心法得到纯度更高的外泌体。另外利用外泌体自身的物理化学性质所研发的各种市售的外泌体分离提取试剂盒也能达到分离效果。
提取的外泌体的鉴定方式主要是通过形态学(电子显微镜技术)、粒子大小以及标志蛋白等方式实现的。
相关研究(点击可详细阅读):
Théry通过比较不同细胞外膜泡亚群蛋白质组学确定不同细胞外膜泡的新型标志物细胞培养上清、新鲜血浆、冻存血浆里外泌体提取的不同方案分离尿液外泌体 选择合适方法很重要Sci Rep:不同的分离方法影响外泌体的生物活性你电镜打到的是外泌体吗?——纳米颗粒与外泌体电镜图像的对比分析挑战大量外泌体的分离纯化不同超速离心方法分离子宫来源外泌体样囊泡的比较哪种外泌体分离方法好
4. 外泌体在疾病中的作用。
最近的研究发现外泌体在很多生理病理上起着重要的作用,如免疫中抗原呈递、肿瘤的生长与迁移、组织损伤的修复等。不同细胞分泌的外泌体具有不用的组成成分和功能,可作为疾病诊断的生物标志物。外泌体具有脂质双层膜结构,能很好的保护其包被的物质,且能靶向特定细胞或组织,因此是一种很好靶向给药系统(targeted delivery system)。
相关研究(点击可详细阅读):
外泌体与肿瘤:
Nature:外泌体整合素分子决定了肿瘤转移的器官倾向性【Nature】被外泌体“教唆犯罪”的肿瘤君外泌体“助力”前列腺癌的发生发展安德森癌症中心余棣华教授Nature文章解读MD安德森“登月”计划运用外泌体靶向胰腺癌新方法定量血浆外泌体miRNA 或可作为转移性乳腺癌标记物肿瘤细胞通过释放器官倾向性小膜泡帮助肿瘤转移外泌体miR21使卵巢癌细胞产生紫杉醇抗药性外泌体中具有传递肿瘤抗药性功能的lncRNA宫颈癌、HPV与外泌体
外泌体与免疫、干细胞:
LPS预处理MSCs通过外泌体传递let-7b调节炎症反应中巨噬细胞极化破骨细胞来源的外泌体miRNA抑制成骨细胞活性MSC外泌体调控组织再生成体心脏前体细胞来源外泌体的心肌保护机制干细胞外泌体作为无细胞治疗剂修复心脏损伤
方法学与机制研究:
外泌体碰上量子物理——荧光量子点标记外泌体体内实时成像技术一种从外泌体中探寻长链RNA的新方法J Cell Biol: 外泌体的形成和分泌调控机制的新发现J CLIN INVEST (IF:13.215)同时发布11篇胞外囊泡相关综述,涵盖多领域内容
其他疾病研究:
胞外囊泡--糖尿病终结者Cell: 寄生虫利用胞外囊泡致疾病!Nature Materials(IF=36.5):细胞外膜泡与动脉粥样硬化的钙化胞外囊泡在脂肪肝中的作用PNAS:外泌体参与机体对疱疹病毒的免疫反应Nat Neurosci:外泌体是阿尔茨海默病的潜在的治疗靶标上海交大研究人员揭示BMSC来源的细胞外囊泡促进骨再生唾液外泌体miRNA可作为衰老的生物标记物外泌体作为组织再生治疗剂耐力运动产生的外泌体缓解代谢相关疾病
5. 外泌体目前的市场应用
虽然外泌体的研究潜力巨大,但目前外泌体的应用仍然处于初级阶段。目前国内外已有报道了一些外泌体的市场价值及产品。
相关信息(点击可详细阅读):
外泌体诊断应用:如何快速检测血液中的外泌体Global Stem Cells Group获得外泌体产品经销权【重磅】Nature biotechnology:外泌体癌症诊断市场应用总结外泌体无创液体活检应用实例:外泌体表面蛋白检测用于肿瘤诊断Exosome Diagnostics发布全球首个真正的非侵入性前列腺癌检测临床数据新型外泌体治疗产品EvOx横空出世 有望对抗不治之症Exosome Diagnostics 开发出首个通过尿液样本检测肾脏移植排斥反应的技术外泌体检测开发商Theragnostex与CliniCan Health Research公司协商合作ReNeuron公司利用外泌体纳米医药平台治疗脑癌Exosome Diagnostics公布检测疾病特异外泌体的新平台数据德州大学西南医学中心将其外泌体技术独家授权给Peregrine制药公司外泌体诊断与治疗:全球市场调查报告
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厉害,新手入门,多学习学习
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楼主太棒了,感谢!
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楼主好棒
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过来学习~~
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发表于 2016-10-22 09:20:31 | 显示全部楼层
版主大爱无疆啊
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发表于 2016-10-26 10:12:36 | 显示全部楼层
对于刚准备接触这个领域的来说非常实用
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发表于 2017-5-30 18:39:10 | 显示全部楼层
新人报道,学习了,多谢分享
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发表于 2017-6-7 16:00:15 | 显示全部楼层
新手感觉找到了组织,谢谢楼主,楼主太棒了~
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发表于 2017-6-12 08:22:15 | 显示全部楼层
楼主,新手请教,液氮里用血清培养过的细胞,解冻后,再用无外泌体血清培养,还能提细胞的外泌体吗
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