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如何利用外泌体高效装载功能性siRNA?

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发表于 2017-4-20 17:49:27 | 显示全部楼层 |阅读模式
如何利用外泌体高效装载功能性siRNA
细胞外囊泡(EVs)是通过在细胞之间转移生物分子(包括蛋白质和RNA)介导细胞间通讯的细胞衍生的膜状纳米颗粒。由于其功能性传递RNA的自然能力,EV可能被用作治疗性RNA载体。该治疗用途的一个主要限制是缺乏有效、稳健和可规模化的方法来加载具有感兴趣的RNA分子到EV中。来自牛津大学的研究人员通过系统评估关键参数的影响,包括孵育时间、体积、温度和EV/cc-siRNA比率,评估和优化了用胆固醇结合的小干扰RNA(cc-siRNA)负载EV的方法。EV负载在最高siRNA保留百分比的条件下,每个EV在37℃下孵育15分钟的cc-siRNA在100μL中1小时,在EV治疗的细胞中促进人抗原R(HuR,癌症治疗靶标)的浓度依赖性沉默。这些结果可能加速基于EV的疗法的发展。
EVs装载cc-siRNA的条件优化
从图中我们可以看出EVs装载cc-siRNA的条件,温度上42度最佳,37度次之;时间上1小时即够;体系上100 μL最佳;比例上EV/cc-siRNA=1:15最佳。
装载cc-siRNA的EVs的效果评价
参考文献:
Functional Delivery of Lipid-Conjugated siRNA byExtracellular Vesicles.Mol Ther. 2017 Apr 6. pii: S1525-0016(17)30120-X. doi:10.1016/j.ymthe.2017.03.021. [Epub ahead of print]IF=5.048
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