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第一次提取外泌体和做TEM,求助大神 电镜是OMV吗

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发表于 2019-6-12 15:41:14 | 显示全部楼层 |阅读模式
在大肠杆菌的培养液里提取的,采用超速离心法,样本在4度放了3天后做的TEM。提取量200 mL。视野中外膜囊泡OMVs少,只有以下 两张能看的图,不知道是不是OMVs,是否具有茶杯托状结构。请各位老师帮忙。



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发表于 2019-6-13 14:06:37 | 显示全部楼层
感觉你的背景很脏,并且很多外泌体都破了,做电镜还是要用新鲜exosomes
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 楼主| 发表于 2019-6-13 14:58:50 | 显示全部楼层
MSCs-EXO 发表于 2019-6-13 14:06
感觉你的背景很脏,并且很多外泌体都破了,做电镜还是要用新鲜exosomes

嗯嗯 第一次提取和看电镜,没什么经验,样品放了一个周末才知道要固定,所以有很多都破了。另外,样品只用超速离心处理过,没有进行密度提取离心纯化。请问现在电镜图上的是外泌体吗? 谢谢
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发表于 2019-6-18 10:10:38 | 显示全部楼层
leety 发表于 2019-6-13 14:58
嗯嗯 第一次提取和看电镜,没什么经验,样品放了一个周末才知道要固定,所以有很多都破了。另外,样品只 ...

应该是
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 楼主| 发表于 2019-6-18 10:42:42 | 显示全部楼层

嗯嗯 谢谢老师,我计划下一步实验:增大培养基体积,然后加入超滤浓缩,超离后的外泌体立即固定,测试TEM。剩余样品进行optiprep的纯化,是否可行?
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发表于 2019-6-25 15:22:08 | 显示全部楼层
请问一下,像电镜结果跟楼主差不多,打质谱会有影响吗? 是经过密度梯度离心了,在-80放了半个月
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