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血清exosome蛋白SDS-PAGE电泳结果求助

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发表于 2016-7-4 16:34:45 | 显示全部楼层 |阅读模式
超离+蔗糖垫提取血清exosome后电泳考马斯亮蓝后的结果~~



有专业人士帮忙分析下么?~
红笔圈出的这一条亮亮的这个很难说是什么呀,这样的图怎么判断外泌体的蛋白纯度呢?

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发表于 2016-7-4 18:23:47 | 显示全部楼层
需要抗体杂一下几个exosome marker
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发表于 2016-7-4 21:04:21 | 显示全部楼层
我也做血清但是和你的图差别好大,我们为了减少上样量都用银染,如果你的marker 是在 Alb or igG 那有可能就是呢。
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 楼主| 发表于 2016-7-4 21:39:24 | 显示全部楼层
Johnny 发表于 2016-7-4 18:23
需要抗体杂一下几个exosome marker

经典的maker都没什么问题~~可是不知道这个纯度怎么样
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 楼主| 发表于 2016-7-4 21:41:02 | 显示全部楼层
微泡biomarker 发表于 2016-7-4 21:04
我也做血清但是和你的图差别好大,我们为了减少上样量都用银染,如果你的marker 是在 Alb or igG 那有可能 ...

是嘛?我做了几遍,红线部分一直都是比较浓的。看过ALb和IGg的分子量都不是那个位置。不知道你有没有做过某些所谓的阴性蛋白,就是说exosome没有得maker,跑出来就说明不纯的那些。不过血清的和细胞的有可比性么?
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发表于 2016-7-24 15:14:49 | 显示全部楼层
你红线部分的分子量多大,要是70KD可能是血清的白蛋白。
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 楼主| 发表于 2016-7-25 21:52:53 | 显示全部楼层
wjy 发表于 2016-7-24 15:14
你红线部分的分子量多大,要是70KD可能是血清的白蛋白。

红线是70,上面那条是100.应该是70-100之间的,我跑过血清的,白蛋白的位置跟这个也不一样~~
现在已经把那块抠出来打质谱鉴定了,等鉴定结果
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发表于 2016-7-26 14:44:59 | 显示全部楼层
丝瓜 发表于 2016-7-25 21:52
红线是70,上面那条是100.应该是70-100之间的,我跑过血清的,白蛋白的位置跟这个也不一样~~
现在已经把 ...

哇这么轻易就可以打质谱啊?能弱弱的问一句,你们是自己实验室有质谱还是拿去外面测质谱
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发表于 2016-7-26 15:19:19 | 显示全部楼层
我是想问,血清exosome跑出来都是这么几条带吗?还是说这几条带其实是血清里的高丰度蛋白没清洗干净遗留下来的 啊?也做这方面,困惑ing.....
微泡,你跑出来血清exosome是什么样子的?
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发表于 2016-7-26 15:21:18 | 显示全部楼层
微泡biomarker 发表于 2016-7-4 21:04
我也做血清但是和你的图差别好大,我们为了减少上样量都用银染,如果你的marker 是在 Alb or igG 那有可能 ...

微泡,你跑出来血清exosome是什么样子的?方不方便看看微泡的考染图或银染图图 啊?
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