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10ml左右的上清 Exo裂解后BCA法测定蛋白浓度50ug/ul 疯了

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发表于 2016-7-14 19:57:20 | 显示全部楼层 |阅读模式
请问是什么原因呢?细胞数在5×10的6次方左右   是不是血清的原因(超离血清制备出问题,残留牛白蛋白)
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发表于 2016-7-15 17:48:34 | 显示全部楼层
你用什么方法提取的?

基本可以断定杂蛋白污染的问题
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 楼主| 发表于 2016-7-15 21:11:58 | 显示全部楼层
Johnny 发表于 2016-7-15 17:48
你用什么方法提取的?

基本可以断定杂蛋白污染的问题

现在找到原因了  是超离血清没有离好的原因
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发表于 2016-7-15 22:44:35 | 显示全部楼层
伙伴们,得到的外泌体测BCA根本测不到,还打算跑wb,可以吗,外泌体冻干了,要裂解吧?怎么裂解呢,求助各位大神
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发表于 2016-7-18 09:40:17 | 显示全部楼层
Iris 发表于 2016-7-15 22:44
伙伴们,得到的外泌体测BCA根本测不到,还打算跑wb,可以吗,外泌体冻干了,要裂解吧?怎么裂解呢,求助各位 ...

你是用试剂盒提的吗?我用试剂盒提的细胞上清里BCA也测不到蛋白量,后来RIPA裂解就能测到了
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发表于 2017-2-10 10:57:46 | 显示全部楼层
pytruth 发表于 2016-7-18 09:40
你是用试剂盒提的吗?我用试剂盒提的细胞上清里BCA也测不到蛋白量,后来RIPA裂解就能测到了 ...

是不是稀释倍数太大的原因?上清的Exosome量确实不能算多,最受我们都用70ml呢
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发表于 2017-2-10 17:34:33 | 显示全部楼层
小心被一些盐分和杂蛋白污染了
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