本帖最后由 hzangs 于 2016-10-14 14:55 编辑
陆峰彬 发表于 2016-10-13 21:36
请教楼主，我们电镜室让我用一种固定的方法染外泌体，不然容易损坏电镜，不知楼主有没有相关了解，谢谢！ ...
没听说过。我们就是负染一下晾干 就上机打。确实电镜没有那么娇贵{:3_60:}
大神，我提出来的外泌体已经拿戊二醛固定了，还可以继续做负染吗？:'(
hzangs 发表于 2015-4-23 11:51
是的。 我将大概2000万 tumor cell 分泌的exosomes 用30ul PBS 充分重悬的。
2000万cell分泌多久得到的？会不会太过于粘稠，30ul体系没办法吸取？
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xunqiben 发表于 2017-2-8 13:30
2000万cell分泌多久得到的？会不会太过于粘稠，30ul体系没办法吸取？
不会有问题的。 充分的吹打 吹打完了过于粘稠的部分就不要了。为了电镜 我直接用掉了这一批样本
请问下楼主，看电镜的蛋白浓度多少合适，太高电镜下看不到
xiapqunqun 发表于 2017-3-14 16:36
请问下楼主，看电镜的蛋白浓度多少合适，太高电镜下看不到
我当时使用的浓度还是很高的， 大概有十几个ug/ul 铜网破了很多 这是找没破的地方拍的。 具体多少合适 我也不是十分清楚。
大神，请问一下，拍透射的时候没有负染这一步可以拍出来吗？
zhousisi0223 发表于 2017-3-15 15:30
大神，请问一下，拍透射的时候没有负染这一步可以拍出来吗？
不行:L
那请问又没有别的染料可以替代呢？