关于细胞培养上清中提取外泌体的相关问题

lczyld

我培养的是细胞系，准备从培养上清中提取外泌体，有做过相关实验的前辈么。1、大概至少得多少上清，才能理想地提取外泌体？
2、换用无外泌体血清的时机和培养时间
3、用的是培养皿还是培养板
如有相关经验的，希望能给予指导，一起交流交流，十分感谢！

lczyld

baishixiaoyaozi 发表于 2017-8-1 23:36
这个很难给你确切答案，不同的细胞系分泌exosome的能力不一样，对血清饥饿的耐受不一样。你可以上pubmed或g ...

谢谢前辈的热心回答！请问您的120ml上清直接拿去超离么，看到文献里有浓缩这一步，不知道怎么做到的。因为我买了ExoQuick-TC Exosome Precipitation Solution (System Biosciences)，推荐是5毫升上清加1毫升试剂，所以上清不能太多了，试剂盒总共就5毫升。

lczyld

tshenbin 发表于 2017-8-2 21:57
建议你用Amicon Ultra-15 100K NMWL进行超滤浓缩，这样可以减少上清体积。

好的，十分感谢您的建议！我试试

lczyld

tshenbin 发表于 2017-8-2 21:57
建议你用Amicon Ultra-15 100K NMWL进行超滤浓缩，这样可以减少上清体积。

前辈，离心时间和离心力多少最合适？

lczyld

wzttray 发表于 2017-9-2 14:22
楼主问一下，你用浓缩之后提取效果怎么样？

提了一次，跑蛋白发现没有CD63的条带   现在在找问题 不知道浓缩的步骤对不对 你呢