超速离心法分离血清

我是小白

请问大家用超速离心法分离血清外泌体时，血清至少需要多少呢，

baishixiaoyaozi

我是小白 发表于 2016-11-24 17:44
请问有提取血清的超速离心法的protocol吗？我自己也找了好多步骤，不知道用哪一个？ ...

我们实验室用两步离心，10000xg，30分钟，去除micro vesicles。100000-150000xg，2小时。

ashey

baishixiaoyaozi 发表于 2016-11-23 09:48
是的，下次实验打算多离心一下，或者用更大的离心力150000xg。

期待楼主分享下一步的经验

土豆

500ul到1ml足够

july

土豆 发表于 2016-11-8 11:38
500ul到1ml足够

请问500ul到1ml能提到多少呢？离心法吗？

baishixiaoyaozi

july 发表于 2016-11-22 21:24
请问500ul到1ml能提到多少呢？离心法吗？

根据我们实验室的结果，人血清EV含量大约为10的11－12次方／毫升，超离后（100000xg，2小时）大概还有40％左右留在上清里。

ashey

baishixiaoyaozi 发表于 2016-11-23 07:10
根据我们实验室的结果，人血清EV含量大约为10的11－12次方／毫升，超离后（100000xg，2小时）大概还有40 ...

超离后这么多留在上清里？

baishixiaoyaozi

ashey 发表于 2016-11-23 08:31
超离后这么多留在上清里？

是的，下次实验打算多离心一下，或者用更大的离心力150000xg。

土豆

july 发表于 2016-11-22 21:24
请问500ul到1ml能提到多少呢？离心法吗？

超离下来的外泌体沉淀肉眼可见，具体多少量的话不好说

baishixiaoyaozi

ashey 发表于 2016-11-23 19:51
期待楼主分享下一步的经验

分享是一定的，不过我不是楼主

july

baishixiaoyaozi 发表于 2016-11-23 07:10
根据我们实验室的结果，人血清EV含量大约为10的11－12次方／毫升，超离后（100000xg，2小时）大概还有40 ...

怎么证明还留下了40%呢？