关于选择哪种试剂盒提取外泌体

yuantingdong · 发表于 2016-7-24 13:06:17

最近老师要我查询一下几种提取外泌体的试剂盒，我查询了一下Qiagen、Life和SBI，SBI大家反映效果不错，但是杂蛋白比较多，life感觉很多人说提取出来看不见外泌体，Qiagen不是很清楚，所以想咨询大家一下如何选择，谢谢！

hzangs · 发表于 2016-7-24 17:18:37

一般的话如果你想发好一点的paper 最好使用超离的方法分离。

如果要使用kit 做的话。 qiagen的kit很适合RNA相关的操作，life 和SBI的kit是沉淀型的kit 分离的外泌体会有很多杂蛋白。如果考虑价格并且没有超速离心机的话你可以考虑直接使用PEG沉淀的方法分离

tcexosome · 发表于 2016-7-25 16:45:45

hzangs 发表于 2016-7-24 17:18
一般的话如果你想发好一点的paper 最好使用超离的方法分离。

如果要使用kit 做的话。 qiagen的kit很适 ...

可PEG沉淀方法，我提不出来都看不见沉淀你有该方法的步骤吗有的话发给我：1412473460@qq.com，谢谢

hzangs · 发表于 2016-7-25 17:06:53

tcexosome 发表于 2016-7-25 16:45
可PEG沉淀方法，我提不出来都看不见沉淀你有该方法的步骤吗有的话发给我：，谢谢 ...

我就是按照 scientific report 里的那篇paper做的。。。你可能需要调整起始量配制PEG 要配置16% 的然后1:1 加入培液里这样才能得到8%的PEG终浓度

tcexosome · 发表于 2016-7-25 18:05:11

hzangs 发表于 2016-7-25 17:06
我就是按照 scientific report 里的那篇paper做的。。。你可能需要调整起始量配制PEG 要配置16% ...

我用的是33%的PEG6000，也没什么效果。。。。。

yuantingdong · 发表于 2016-7-26 10:21:33

hzangs 发表于 2016-7-24 17:18
一般的话如果你想发好一点的paper 最好使用超离的方法分离。

如果要使用kit 做的话。 qiagen的kit很适 ...

您好！咨询一下，我做的是RNA，后续试验不一定需要做蛋白，SBI试剂盒提外泌体含杂蛋白，是不是意味着做RNA没什么问题？谢谢

hzangs · 发表于 2016-7-26 11:50:23

yuantingdong 发表于 2016-7-26 10:21
您好！咨询一下，我做的是RNA，后续试验不一定需要做蛋白，SBI试剂盒提外泌体含杂蛋白，是不是意味着做RN ...

可以这么理解。但是遇到严厉的reviewer 也可能被argue。注意设置好对照。

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