想统计下大家用超速离心时一次用多少量的细胞上清才够用

bobo · 发表于 2015-5-26 10:25:36

木瓜31 发表于 2015-5-25 16:40
不会发图。。你看看这篇文章吧Isolation and Characterization of Exosomes from Cell Culture Superna ...

我想用试剂盒提exosome,那么如何将100ml的细胞培养液浓缩到4ml,从而使培养液中的exosome浓度大些

木瓜31 · 发表于 2015-5-25 16:40:08

ashey 发表于 2015-5-21 08:30
可以再了解一下各个离心条件下离出来的沉淀和上清分别是什么。

不会发图。。你看看这篇文章吧Isolation and Characterization of Exosomes from Cell Culture Supernatants
and Biological Fluids

木瓜31 · 发表于 2015-5-25 16:38:46

D:\桌面陈雅静\外泌体之家\QQ图片20150525163753.png

ashey · 发表于 2015-5-21 08:30:37

木瓜31 发表于 2015-5-7 21:43
300g pellet=cell,2000g pellet=dead cell.个人感觉先以较低速度把细胞离下比较合理，也许直接上2000g细 ...

可以再了解一下各个离心条件下离出来的沉淀和上清分别是什么。

bobo · 发表于 2015-5-20 23:24:29

woshiyywlly 发表于 2015-4-21 13:48
对照和实验组各16个dish

实验组和对照组怎么设置啊？

木瓜31 · 发表于 2015-5-7 21:43:13

luckkit 发表于 2015-4-24 12:38
另外，请教一下，俺是收集上清后直接2000g 30min,然后0.22um过滤，10e4 30min, 10e5 2hrs, 开始没有300g 10 ...

300g pellet=cell,2000g pellet=dead cell.个人感觉先以较低速度把细胞离下比较合理，也许直接上2000g细胞应激下会分泌外泌体？谁知道呢。。

木瓜31 · 发表于 2015-5-7 21:37:39

那一般多少量细胞上清超离够做电镜鉴定呢？

Johnny · 发表于 2015-4-24 13:34:01

luckkit 发表于 2015-4-24 12:38
另外，请教一下，俺是收集上清后直接2000g 30min,然后0.22um过滤，10e4 30min, 10e5 2hrs, 开始没有300g 10 ...

没设计实验比较过，但个人觉得影响不大

luckkit · 发表于 2015-4-24 12:38:17

另外，请教一下，俺是收集上清后直接2000g 30min,然后0.22um过滤，10e4 30min, 10e5 2hrs, 开始没有300g 10min，有什么影响吗？

Johnny · 发表于 2015-4-22 17:28:45

luckkit 发表于 2015-4-21 13:35
偶觉得还少了两个参数，细胞类型和数量

嗯嗯，是的。细胞类型和数量影响也蛮大的

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