外泌体BCA测出蛋白浓度太低，请教大家

exosun · 发表于 2016-11-15 13:05:59

我用2016年的protocol超离的外泌体，看不到沉淀，重悬在200ulPBS中-80保存，4天后不加裂解液，直接BCA测定蛋白浓度，想跑标志蛋白的western，蛋白浓度很低，只有0.396ug/ul，请问大家可能是哪里出了问题？

exosun · 发表于 2016-11-16 00:16:24

baishixiaoyaozi 发表于 2016-11-15 23:21
0.4ug/ul，浓度还可以，一般上样量5－10ug左右就可以检测到绝大部分标志蛋白了（CD63，Tsg101，Flotilin 1 ...

谢谢，明天就准备干起来了！

wxx · 发表于 2022-10-12 21:31:34

sy123 发表于 2022-3-22 17:46
我提的外泌体：40ml细胞上清沉淀法提取 200ul重悬 BCA测浓度 0.3ug/ul

您好，请问你的是什么细胞呢？还有细胞数大概是多少呢

发货33 · 发表于 2022-9-12 10:11:53

发祥于中国北部、朝鲜、日本、俄罗斯等北半球温带地区。据记载，公元前古巴比伦、古希腊已广泛种植。其中在古希腊的建筑装饰、铸造的钱币和克里特岛的壁画中，都发现有用玫瑰花做主题的雕刻及绘画。公元初期，古罗马帝国开始兴盛，古埃及人把西南亚的玫瑰贩往罗马。12世纪后，欧洲各国兴起玫瑰种植业，尤其在英国

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1016646059@qq.c · 发表于 2022-8-14 21:48:17

请问一下我用裂解液裂解了之后BCA测的蛋白浓度为0.2ug/ul，上样量30ul 直接是白板
想试一下不裂解跑一次不裂解的话直接加loading buffer需要加多少呀
还有如果要和细胞裂解液一起是不是要保证两者的蛋白含量一致

sy123 · 发表于 2022-4-22 20:21:29

kaduoniya 发表于 2022-3-25 11:13
请问，您用的是什么细胞，培养多久后收集的细胞上清

MDA-MB231 48小时方便加一个微信聊吗？还想请教你一些问题，13652032811

kaduoniya · 发表于 2022-3-25 11:13:31

sy123 发表于 2022-3-22 17:46
我提的外泌体：40ml细胞上清沉淀法提取 200ul重悬 BCA测浓度 0.3ug/ul

请问，您用的是什么细胞，培养多久后收集的细胞上清

sy123 · 发表于 2022-3-22 17:46:59

我提的外泌体：40ml细胞上清沉淀法提取 200ul重悬 BCA测浓度 0.3ug/ul

zhangchao · 发表于 2020-7-9 18:08:57

exosun 发表于 2017-2-12 19:08
都是实验室可以直接领的试剂，没有试剂盒。

你好，请问外泌体的裂解你是怎么配制的呀

zhangchao · 发表于 2020-7-6 18:50:32

JKF 发表于 2018-1-23 21:25
测BCA 需要先裂解吗

你好你裂解了么

DBLB · 发表于 2019-10-22 15:00:56

CheungKL 发表于 2019-10-22 14:47
你好，请问你wb的外泌体样品是怎么处理的？跑的是哪些marker呢？谢谢

200ml培养上清超离，2mlPBS重悬。检测了CD63

CheungKL · 发表于 2019-10-22 14:47:47

DBLB 发表于 2019-10-11 19:11
您好，我检测出来蛋白质浓度很低，基本上检测不到，用BCA检测只有30ng/ul左右，但是WB却没有问题，条带很 ...

你好，请问你wb的外泌体样品是怎么处理的？跑的是哪些marker呢？谢谢

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