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发表于 2015-4-23 10:36:36 | 只看该作者 回帖奖励 |正序浏览 |阅读模式
本帖最后由 hzangs 于 2017-7-11 15:54 编辑

大家好,我是johnny的舍友。上次交流我说给大家展示一下自己的电镜图,所以现在贴一下给大家看~
这张看上去有点模糊,可能是放大倍数的关系…   基本上还是比较接近典型的形状。 我也有大个头的,就像第二个图,但大部分都是100nm一下的。
版权所有,请勿转载或发表使用,谢谢
制样:
40ml 培液超速离心分离得到的外泌体,重悬于20-30ul PBS中。
吸取样品10ul 滴加于铜网上沉淀1min,滤纸吸去浮液,
吸取2%的醋酸双氧铀10ul滴加于铜网上沉淀1min,滤纸吸去浮液,
常温干燥数分钟。上机

80kv-120kv 成像

      

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发表于 2015-4-24 15:53:02 | 只看该作者
同问具体负染了什么,谢谢!
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 楼主| 发表于 2016-3-29 09:56:32 | 只看该作者
xinyi717 发表于 2016-3-28 20:33
请问一下 pbs 是买的公司的吗,感觉自己配的1xpbs 会有杂质呢,感觉影响观察~谢谢 ...

自己配的。  你要感觉有杂质   就过一下0.22的滤器。
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发表于 2015-4-23 21:34:39 | 只看该作者
问一下 负染的 染料是什么啊
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发表于 2022-2-25 22:04:56 | 只看该作者
学习学习,向大神学习!
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 楼主| 发表于 2021-4-6 09:31:49 | 只看该作者
羊啊羊呀羊 发表于 2021-4-3 19:04
看了前辈之前的经验,可能是我再-80℃冻存的原因?但是我已提取出来立马就测了粒径,和冻存之后的粒径一样 ...

粒径测试,我们一般不作为权威数据。放在文章里充个数,不给审稿人问    就可以了
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发表于 2021-4-3 19:04:37 | 只看该作者
看了前辈之前的经验,可能是我再-80℃冻存的原因?但是我已提取出来立马就测了粒径,和冻存之后的粒径一样,都是在200-300nm诶
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发表于 2021-4-3 18:25:52 | 只看该作者
本帖最后由 羊啊羊呀羊 于 2021-4-3 18:33 编辑

老师您好,这是我第一次提取拍出来的结果,不确定这里面有没有外泌体,希望各位前辈指点一下:第一是感觉囊泡大小特别不均匀,杂质很多的样子,可我的细胞上清超离前过了0.22um的滤膜,不知为何?其次是我复溶时会吹打大概100次,但小粒径的像是外泌体的囊泡还是团聚特别严重,不知老师们有没有什么经验C:\Users\Lenovo\Desktop\羊啊羊exos\表征\新建文件夹

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发表于 2021-3-30 14:01:53 | 只看该作者
hzangs 发表于 2021-3-22 13:05
4°   7天,尝试过,OK  但是有囊泡抱团现象

好的好的,感谢大佬
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 楼主| 发表于 2021-3-22 13:05:11 | 只看该作者
zx190214 发表于 2021-3-22 12:55
请问,外泌体多少度最多保存几天能在电镜下观察到,因为是寄出去做的

4°   7天,尝试过,OK  但是有囊泡抱团现象
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发表于 2021-3-22 12:55:35 | 只看该作者
请问,外泌体多少度最多保存几天能在电镜下观察到,因为是寄出去做的
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发表于 2020-11-11 15:21:31 | 只看该作者
马克 谢谢楼主
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发表于 2020-9-28 17:08:35 | 只看该作者
各位大神,我的电镜图打出来以后背景有很多条状杂质,不知道是什么东西,请问一下背景脏应该如何改进呢?我用的是超离的方法提取外泌体,超离前会用0.22um滤膜过滤一遍,100ml上清最后用100ulPBS重悬,没有稀释直接送样打电镜。不知道杂质是不是PBS里的盐或者什么?
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