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如何提高提取的外泌体浓度

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楼主
发表于 2017-11-13 21:29:36 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式
由于要做外泌体刺激细胞的实验,测定外泌体浓度的时候,用Braford法测出来的浓度,通过以前的标准曲线测出来竟然是负的,算不出浓度,没法进行下一步,求大神指点(PS:我用的是10000G离心30min-100000G离心1H30MIN-100000G离心1H30MIN的方法)
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沙发
 楼主| 发表于 2017-11-14 14:35:00 | 只看该作者
Johnny 发表于 2017-11-14 11:31
多用点细胞上清呗

离心管30毫升一个,六个管都放满啦
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发表于 2017-11-14 21:59:59 | 只看该作者
离心时间长一点,比如3h
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发表于 2017-11-15 21:55:22 | 只看该作者
像我3.1ml的管我能放几个呢= =
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发表于 2017-11-18 06:18:32 | 只看该作者
我看好多文章都是用的micro-BCA protein assay定量,普通的蛋白定量试剂盒检测灵敏度不够的
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发表于 2017-11-29 11:38:09 | 只看该作者
更多的上清,可以考虑先浓缩再超离。
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 楼主| 发表于 2017-12-1 21:34:28 | 只看该作者
cloudy47 发表于 2017-11-29 11:38
更多的上清,可以考虑先浓缩再超离。

如何浓缩?
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发表于 2017-12-4 08:42:54 | 只看该作者

用超滤管。
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发表于 2017-12-6 15:58:21 | 只看该作者
我一般是先浓缩,然后两台机器一起跑第一次的70min,然后再把所有的管子底下1mm的液体冲洗管底,放到一个管子里,然后再离心第二个70min。
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