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外泌体分离方法选择求助

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发表于 2017-6-19 23:10:08 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式
请问大家我想要研究外泌体某种蛋白的功能,用试剂盒提取或者PEG+超离清洗的方法是否可行呢,杂蛋白的影响大吗?
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发表于 2017-6-20 10:59:21 | 只看该作者

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如果研究外泌体蛋白的功能, 基本可以放弃沉淀试剂盒或者PEG+超离的方法了,这些方法带来的杂蛋白影响太大。
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 楼主| 发表于 2017-6-20 19:37:03 | 只看该作者
hzangs 发表于 2017-6-20 10:59
如果研究外泌体蛋白的功能, 基本可以放弃沉淀试剂盒或者PEG+超离的方法了,这些方法带来的杂蛋白影响太大 ...

那看来只能用超离了,谢谢大神的解答
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 楼主| 发表于 2017-6-22 15:53:14 | 只看该作者
hzangs 发表于 2017-6-20 10:59
如果研究外泌体蛋白的功能, 基本可以放弃沉淀试剂盒或者PEG+超离的方法了,这些方法带来的杂蛋白影响太大 ...

再次求教大神,我如果加一步0.22um过滤的步骤和最后PBS清洗,可以去除杂蛋白吗?还有个问题就是超离现在做不了,我可以用试剂盒提取的外泌体做电镜和western鉴定,然后后续实验再去超离吗,新手感觉到处都是疑惑,还请大神不令赐教,谢谢啦
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 楼主| 发表于 2017-6-22 15:54:02 | 只看该作者
hzangs 发表于 2017-6-20 10:59
如果研究外泌体蛋白的功能, 基本可以放弃沉淀试剂盒或者PEG+超离的方法了,这些方法带来的杂蛋白影响太大 ...

再次求教大神,我如果加一步0.22um过滤的步骤和最后PBS清洗,可以去除杂蛋白吗?还有个问题就是超离现在做不了,我可以用试剂盒提取的外泌体做电镜和western鉴定,然后后续实验再去超离吗,新手感觉到处都是疑惑,还请大神不令赐教,谢谢啦
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发表于 2017-6-23 10:58:58 | 只看该作者
做功能研究,SBI的试剂也不能用了吧,好像那个沉淀试剂盒也是PEG吧?
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发表于 2017-8-24 15:54:43 | 只看该作者
那如果exosome直接拿来做制剂呢?是否还可以再用PEG+超离的方法
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发表于 2017-8-30 20:59:50 | 只看该作者
想问一下各位大神,用于提取外泌体的血浆,-80°能存放多久呢?因为一次收不够样本,打算取血离心,然后存于-80°,那么能存多久?对外泌体影响大么?
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