外泌体分离方法选择求助

范范 · 发表于 2017-6-19 23:10:08

请问大家我想要研究外泌体某种蛋白的功能，用试剂盒提取或者PEG+超离清洗的方法是否可行呢，杂蛋白的影响大吗？

hzangs · 发表于 2017-6-20 10:59:21

如果研究外泌体蛋白的功能，基本可以放弃沉淀试剂盒或者PEG+超离的方法了，这些方法带来的杂蛋白影响太大。

范范 · 发表于 2017-6-20 19:37:03

hzangs 发表于 2017-6-20 10:59
如果研究外泌体蛋白的功能，基本可以放弃沉淀试剂盒或者PEG+超离的方法了，这些方法带来的杂蛋白影响太大 ...

那看来只能用超离了，谢谢大神的解答

范范 · 发表于 2017-6-22 15:53:14

hzangs 发表于 2017-6-20 10:59
如果研究外泌体蛋白的功能，基本可以放弃沉淀试剂盒或者PEG+超离的方法了，这些方法带来的杂蛋白影响太大 ...

再次求教大神，我如果加一步0.22um过滤的步骤和最后PBS清洗，可以去除杂蛋白吗？还有个问题就是超离现在做不了，我可以用试剂盒提取的外泌体做电镜和western鉴定，然后后续实验再去超离吗，新手感觉到处都是疑惑，还请大神不令赐教，谢谢啦

范范 · 发表于 2017-6-22 15:54:02

hzangs 发表于 2017-6-20 10:59
如果研究外泌体蛋白的功能，基本可以放弃沉淀试剂盒或者PEG+超离的方法了，这些方法带来的杂蛋白影响太大 ...

再次求教大神，我如果加一步0.22um过滤的步骤和最后PBS清洗，可以去除杂蛋白吗？还有个问题就是超离现在做不了，我可以用试剂盒提取的外泌体做电镜和western鉴定，然后后续实验再去超离吗，新手感觉到处都是疑惑，还请大神不令赐教，谢谢啦

cneagle66 · 发表于 2017-6-23 10:58:58

做功能研究，SBI的试剂也不能用了吧，好像那个沉淀试剂盒也是PEG吧？

papatrick · 发表于 2017-8-24 15:54:43

那如果exosome直接拿来做制剂呢？是否还可以再用PEG+超离的方法

gj417439623 · 发表于 2017-8-30 20:59:50

想问一下各位大神，用于提取外泌体的血浆，-80°能存放多久呢？因为一次收不够样本，打算取血离心，然后存于-80°，那么能存多久？对外泌体影响大么？

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