请教关于血浆外泌体提取的问题

zzycircle

baishixiaoyaozi 发表于 2017-9-25 20:48
全血1000g离心10分钟，取血浆，然后1000g再离心10分钟去除血细胞。血浆用particle-free PBS稀释后离心，1 ...

谢谢啦  可以再问一下PBS稀释比例吗

baishixiaoyaozi

zzycircle 发表于 2017-9-26 22:24
谢谢啦  可以再问一下PBS稀释比例吗

我是按照所用的超速离心管大小来稀释的。我用5毫升的离心管，加1毫升plasma，用4毫升PBS稀释（最少用2.5毫升PBS，超速离心样品体积不能少于离心管最大体积的70%）

zzycircle

baishixiaoyaozi 发表于 2017-9-27 21:26
我是按照所用的超速离心管大小来稀释的。我用5毫升的离心管，加1毫升plasma，用4毫升PBS稀释（最少用2.5 ...

好的谢谢啦  我用的5ml pbs稀释300u的

深呼吸的行者

baishixiaoyaozi 发表于 2017-8-17 23:21
增加起始的exosome量，如果用Trizol试剂提取，沉淀时放在-20过夜，同时加入glycogen共沉淀。RNAseq，如果 ...

谢谢前辈回答。那么glycogen应该加多少呢？

baishixiaoyaozi

深呼吸的行者 发表于 2017-10-31 09:46
谢谢前辈回答。那么glycogen应该加多少呢？

我一般加15-20微克，离心后就能看到沉淀。

liyanyan

丫丫 发表于 2017-3-29 09:53
我用的是SBI的，其他的还没用过

请问提取的质量如何？

快乐的人

丫丫 发表于 2016-11-16 14:54
好的！十分感谢！

请问一下为什么离心前要用PBS稀释血浆，不稀释可以吗？

快乐的人

baishixiaoyaozi 发表于 2017-9-5 21:31
如果用试剂盒的话，参考使用说明书。
我们实验室用EDTA，然后超速离心收集，对外泌体没有影响（至少用到 ...

用EDTA抗凝  配方的比例是多少呀

baishixiaoyaozi

快乐的人 发表于 2018-7-28 09:57
用EDTA抗凝  配方的比例是多少呀

http://www.bd.com/en-us/offering ... -faq/edta-tubes-faq

快乐的人

baishixiaoyaozi 发表于 2018-7-31 04:16
http://www.bd.com/en-us/offerings/capabilities/specimen-collection/blood-collection/venous-collect ...

请问一下提取血浆中的miRNA 需要什么试剂盒