PKH26和PKH67标记

yuantingdong · 发表于 2016-9-30 15:35:21

请教各位大神几个问题。（1）PKH26和PKH67标记有什么区别？是不是都可以用来标记外泌体？（2）我看PKH67标记步骤里面有一个BSA 终止染色，这个BSA和配抗体稀释液以及免疫荧光BSA封闭液的BSA相同吗？（3）PKH67标记步骤中，标记后为什么还要重提外泌体呢？谢谢！另附一张PKH67标记步骤，大家帮我看看有没有问题，三克油！

yuantingdong · 发表于 2016-10-6 09:27:04

惜名发表于 2016-10-5 19:46
1、颜色的区别，一个红色，一个绿色，看你需要什么颜色。
2、BSA是相同的，但浓度不一样~
3、标记后重提， ...

谢谢惜名兄！解答得很详细

yuantingdong · 发表于 2016-10-17 09:54:47

惜名发表于 2016-10-5 19:46
1、颜色的区别，一个红色，一个绿色，看你需要什么颜色。
2、BSA是相同的，但浓度不一样~
3、标记后重提， ...

请教惜名兄，我用的SBI试剂盒提取外泌体，提取出来后，如果做电镜，需要用多少体积PBS溶解外泌体？另外，如果提取RNA是不是直接加trizol，如果提取蛋白质就直接加蛋白裂解液？谢谢

yuantingdong · 发表于 2016-10-19 08:34:59

惜名发表于 2016-10-18 17:24
1、加多少PBS,你自己要摸索的；2、是的，直接加trizol或ripa

好的，谢谢惜名兄！还请教你一下，外泌体抽提后做WB，但不是立马做，是用PBS溶解放-80°C保存吗？如果这样，在提取蛋白之前用多大离心力可以把外泌体从PBS中分离沉淀出来？谢谢！

yuantingdong · 发表于 2016-10-21 20:42:27

惜名发表于 2016-10-21 17:20
如果你再次从PBS里分离exo，就要再次超离了。。。所以，你可以把沉淀直接保存在-80度，不要重悬。或者重 ...

谢谢惜名兄，I see

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