DiR外泌体体内示踪

SYSUCC-Deng · 发表于 2019-7-2 10:38:22

请教：我想看肿瘤细胞外泌体体内的器官摄取定位，超速离心提取外泌体，取40ug外泌体用PE的DiR标记半个小时，然后用invitrogen的MW3000外泌体过滤柱洗涤（宋尔卫教授文章xtracellular vesicle-packaged HIF-1α-stabilizing lncRNA from tumour-associated macrophages regulates aerobic glycolysis of breast cancer cells用过），然后小鼠尾静脉注射，12h后用布鲁克拍摄ex-vivo照片，如图：是不是能说明外泌体都聚集在肝脏，不在肺？还是说有可能是在肝脏里边代谢了？

hzangs · 发表于 2019-7-2 20:00:03

仅有这一个实验你说的哪两种可能都存在。但看你自己想怎么解释了。

baishixiaoyaozi · 发表于 2019-7-2 21:25:42

时间点也很重要吧。
比如尾静脉注射后1小时取样，结果肯定和12小时后取样不同。

SYSUCC-Deng · 发表于 2019-7-2 22:55:50

谢谢两位的意见！我看文献多的是尾静脉注射后12h跟24h拍荧光

cui_0029 · 发表于 2020-2-28 13:47:04

请教：你好，请问您是直接把DIR标记的外泌体经尾静脉注射12h之后拍的荧光吗？还有没有其他的处理？因为我们也这样做过一次，用的活着的小鼠（没有把器官取出来拍），但是老师说小鼠本底荧光比较强，看不出来exosome的荧光，我们是注射完2h去拍的，也有可能是因为还没有完全和细胞膜结果导致信号不强。您有没有好的建议，谢谢！