SBI试剂盒提取培养液及血清外泌体protocol

yuantingdong · 发表于 2016-10-17 15:58:23

请教一下，我整理了一下SBI试剂盒提取培养液和血清外泌体的步骤，麻烦用SBI提取外泌体的亲们帮我审阅审阅呗，十分感谢！

katuysha · 发表于 2017-4-18 17:34:52

芮苏遥发表于 2017-4-18 12:42
请问下，其他来源外泌体的标志蛋白 WB验证有出条带嘛？

kit沉淀完后，加一步洗脱，用大体积的PBS洗去杂蛋白，再离心收集，这样就可以用WB做出结果。只是这样会损失大量的外泌体。

JKF · 发表于 2017-12-22 17:07:51

血清提取的话，也是要离心30分钟吧

guodier · 发表于 2017-12-22 12:02:28

感谢 mark

katuysha · 发表于 2017-11-8 13:38:57

waimiti 发表于 2017-11-7 01:34
请教一下您，如何洗脱，是1500g ,5min中离心之后再加PBS洗脱么？离心力和时间怎么定？谢谢 ...

就是在用kit得到你的最终沉淀之后啊，离心力是越大越好，同理，时间也是越久越好。

waimiti · 发表于 2017-11-7 01:34:01

katuysha 发表于 2017-4-18 17:34
kit沉淀完后，加一步洗脱，用大体积的PBS洗去杂蛋白，再离心收集，这样就可以用WB做出结果。只是这样会损 ...

请教一下您，如何洗脱，是1500g ,5min中离心之后再加PBS洗脱么？离心力和时间怎么定？谢谢

芮苏遥 · 发表于 2017-4-21 11:09:18

katuysha 发表于 2017-4-19 14:13
是的，PBS需要20-30ML，离心力越大越好。

下次试试，非常感谢！

katuysha · 发表于 2017-4-19 14:13:09

芮苏遥发表于 2017-4-19 01:12
是将试剂盒提取出的外泌体用PBS重悬，然后用10000g再次离心取沉淀的意思吗？请问下大概需要多少的量，谢 ...

是的，PBS需要20-30ML，离心力越大越好。

芮苏遥 · 发表于 2017-4-19 01:12:02

katuysha 发表于 2017-4-18 17:34
kit沉淀完后，加一步洗脱，用大体积的PBS洗去杂蛋白，再离心收集，这样就可以用WB做出结果。只是这样会损 ...

是将试剂盒提取出的外泌体用PBS重悬，然后用10000g再次离心取沉淀的意思吗？请问下大概需要多少的量，谢谢~~~

芮苏遥 · 发表于 2017-4-18 12:46:03

zergbloody 发表于 2017-4-15 10:54
您好，请问血浆提取的步骤和血清有什么区别呢？我刚开始做，想用SBI的试剂提取血浆外泌体。谢谢！ ...

linvitrogen有针对CM,plasma，serum 的exosome提取试剂盒。最近在做血浆外泌体的提取

		自动登录	找回密码
密码			立即注册

站长推荐 /1