跪求外泌体RNA的提取方法？

xiaodoudou

各位大神，你们都是怎么提取外泌体中的RNA的呢？用nanodrop能测出浓度吗？

桃子味气泡水

baishixiaoyaozi 发表于 2016-11-24 04:44
我们实验室提microRNA，先用Trizol裂解，然后再用Ambion试剂盒提取。含量确实不高，不过real time－PCR够用 ...

请问您是测出RNA浓度后，用不同样本的相同量的RNA进行逆转录吗？技术支持说外泌体RNA太少，可以直接进行RT-qPCR，但是我疑惑：不同样本CT值相差太大怎么办，还是说每个样本都先用内参去摸索合适浓度的DNA模板从而调控CT值？

MMM

子小匕禾页非文 发表于 2019-1-15 17:27
请问糖原比例怎么加啊，通常上清和异丙醇1：1，之后糖原再加多少呀

请问你知道糖原怎么加了吗 加糖原提的RNA可以用来做二代测序吗

子小匕禾页非文

wxz 发表于 2016-11-28 17:01
是用异丙醇沉淀RNA时加入糖原，糖原可以促进核酸的溶解

请问糖原比例怎么加啊，通常上清和异丙醇1：1，之后糖原再加多少呀

子小匕禾页非文

阿赵 发表于 2018-12-22 11:05
请问下异丙醇和糖原的比例是多少呀？

请问异丙醇和糖原的比例是多少呀

baishixiaoyaozi

阿赵 发表于 2018-12-22 11:16
请问酒精到底用70%还是75%的呀？有区别吗，

没区别，都可以。

阿赵

baishixiaoyaozi 发表于 2016-11-28 21:46
之后过柱，70％酒精洗，最后用RNase free water洗脱，测浓度

请问酒精到底用70%还是75%的呀？有区别吗，

阿赵

wxz 发表于 2016-11-28 17:01
是用异丙醇沉淀RNA时加入糖原，糖原可以促进核酸的溶解

请问下异丙醇和糖原的比例是多少呀？

xiaodoudou

baishixiaoyaozi 发表于 2016-11-28 21:46
之后过柱，70％酒精洗，最后用RNase free water洗脱，测浓度

谢谢

xiaodoudou

wxz 发表于 2016-11-28 17:02
糖原是在加入异丙醇沉淀RNA时加入；糖原可以促进核酸溶解

Thank you